Eletroforese em gel vs SDS PAGE
A eletroforese pode ser utilizada para determinar a massa de um objeto geralmente para proteínas e ácido desoxirribonucléico (DNA). A cadeia de DNA, quando introduzida nos produtos químicos, pode acelerar ou desacelerar o processo de informação. Marcadores de DNA de massa conhecida são usados para aproximar o tamanho dos objetos que viajam após o término da eletroforese. A eletroforese provavelmente é a ferramenta mais usada por biólogos moleculares e bioquímicos.
Existem dois tipos de eletroforese que são comumente usados nesse processo. São eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecilsulfato de sódio (SDS-PAGE) e eletroforese em gel nativa.
O SDS-PAGE é um método não seletivo de eletroforese em gel usado em áreas como: bioquímica, forense, biologia e genética para separar proteínas de sua mobilidade eletroforética. O SDS é um surfactante aniônico que pode ser usado para auxiliar na lisação das células durante a extração do DNA e na separação de proteínas no SDS-PAGE. Durante a eletroforese, uma mistura de proteínas é primeiro liquefeita em uma solução de SDS. Em seguida, uma substância chamada Mercaptoeetanol é aplicada para remover as ligações dissulfeto para tornar a proteína linear. A eletroforese é então iniciada. Os resultados produziriam dois resíduos de moléculas, um dos quais é SDS-PAGE.
A ausência de SDS-PAGE não é um problema, pois a eletroforese em gel ainda pode ser feita apenas para que as proteínas não percam toda a sua estrutura secundária e terciária e não se abram em bastonetes geralmente retos.
Enquanto isso, a eletroforese em gel nativo utiliza o gel como meio anticonvetivo. É geralmente usado para a separação de macromoléculas biológicas, como DNA, ácido ribonucleico (RNA) e proteína. Também pode ser usado para separação de nanopartículas.
Existem dois géis principais usados na eletroforese em gel nativo, a saber:
Gel de agarose, usado para moléculas maiores. Este gel não identifica pequenas diferenças entre duas bandas moleculares. Também é usado apenas para a separação do DNA. A visualização do gel de agarose é feita com a mistura de brometo de etídio.
Gel de poliacrilamida que é usado para moléculas menores. Este gel identifica as diferenças entre as bandas moleculares. Além do DNA, ele também pode separar proteínas.
Resumo:
1.SDS-PAGE é um método não seletivo de eletroforese em gel usado em campos como: bioquímica, forense, biologia e genética para separar proteínas de sua mobilidade eletroforética, enquanto a eletroforese em gel geralmente é usada para a separação de macromoléculas biológicas, como o DNA, ácido ribonucleico (RNA) e proteína. Também pode ser usado para separação de nanopartículas.
A eletroforese em gel 2.Native possui dois tipos, a saber: gel de agarose e gel de poliacrilamida.