Diferença entre vetores YAC e BAC

Diferença de chave - YAC vs BAC Vectors
 

Os vetores são usados ​​na clonagem molecular. Um vetor pode ser definido como uma molécula de DNA que se comporta como um veículo para transportar material genético estranho para outra célula. Um vetor contendo DNA estranho é conhecido como DNA recombinante e deve ter a capacidade de replicá-lo e expressá-lo no organismo hospedeiro. Cromossomo artificial de levedura (YAC) e cromossomo artificial bacteriano (BAC) Existem dois tipos de vetores envolvidos na clonagem. A principal diferença entre YAC e BAC é que YAC é um sistema vetorial construído artificialmente usando uma região específica do cromossomo da levedura para inserir grandes segmentos de materiais genéticos nas células da levedura enquanto O BAC é um sistema vetorial construído artificialmente usando uma região específica de E. coli cromossomo para inserir grandes segmentos de DNA E. coli células.

CONTEÚDO
1. Visão geral e principais diferenças
2. O que são vetores YAC
3. O que são vetores BAC
4. Comparação lado a lado - vetores YAC x BAC
5. Resumo

O que são vetores YAC?

YAC (cromossomo artificial de levedura) é um cromossomo artificialmente construído que tem a capacidade de transportar um grande segmento de DNA estranho e se replicar dentro das células de levedura. Possui um centrômero, telômeros e seqüências de replicação autônoma que são essenciais para replicação e estabilidade. O YAC também deve ter um marcador ou marcadores seletivos e locais de restrição para torná-lo um vetor de clonagem eficaz. Uma grande sequência variando de 1000 kb a 2000 kb pode ser inserida no YAC e transferida para o fermento. A eficiência de transformação do YAC é muito baixa.

Figura 01: Vetor YAC

O que são vetores BAC?

O cromossomo artificial bacteriano (BAC) é um cromossomo artificialmente construído para clonagem molecular. Possui regiões específicas de E. coli Plasmídeo F e é circular e super enrolado. O BAC é desenvolvido para clonar fragmentos de DNA em bactérias, especialmente em E. coli. Pode suportar fragmentos de DNA com tamanhos de até 300 kb. Comparado ao YAC, as inserções de clonagem de BAC são menores em tamanhos. Os BACs foram desenvolvidos em 1992 e ainda são populares devido à sua estabilidade e facilidade de construção. Os BACs também são úteis no desenvolvimento de vacinas.

Figura 02: Vetor BAC na clonagem molecular

Qual é a diferença entre os vetores YAC e BAC?

Vetores YAC vs BAC
YAC é um cromossomo geneticamente modificado com o uso de DNA de levedura para fins de clonagem.	O BAC é uma molécula de DNA geneticamente modificada usando E. coli DNA para fins de clonagem.
Gênero
Os YACs foram projetados para clonar grandes fragmentos de DNA genômico em leveduras.	Os BACs foram desenvolvidos para clonar grandes fragmentos genômicos em Escherichia coli.
Inserir comprimento
Os YACs podem conter inserções genômicas do tamanho de megabase. (1000 kb - 2000 kb).	Os BACs podem transportar inserções de 200 a 300 kb ou menos.
Construção
O DNA YAC é difícil de purificar intacto e requer alta concentração para gerar o sistema vetorial YAC.	O BAC é fácil de purificar intacto e pode ser facilmente construído.
Quimerismo
YACs são frequentemente quiméricos.	BACs raramente são quiméricos.
Estabilidade
YAC é instável.	BAC é estável.
Modificações
A recombinação de leveduras é muito viável e sempre permanece ativa. Portanto, ele pode gerar exclusões e outros rearranjos em um YAC.	E. coli a recombinação é impedida e ativada quando necessário. Portanto, reduz os rearranjos indesejados nos BACs.
Manutenção
A manipulação de YACs recombinantes geralmente requer que o YAC seja transferido para E. coli para manipulação subsequente. Portanto, é um processo trabalhoso.	A modificação do BAC ocorre diretamente no E. coli. Portanto, não há necessidade de transferência de DNA. Portanto, o processo não é trabalhoso.

Resumo - Vetores YAC vs BAC

O YAC se tornou uma ferramenta essencial de pesquisa em processos de clonagem, devido à sua capacidade de clonar grandes fragmentos de DNA no organismo hospedeiro. No entanto, os YACs têm várias desvantagens como vetores, como dificuldades de construção, quimerismo, instabilidade, etc. Portanto, para superar esses problemas, os cientistas desenvolveram vetores de BAC. O BAC foi construído usando regiões específicas de E. coli cromossoma. É um vetor estável e pode ser facilmente construído. No entanto, o comprimento do DNA que o BAC pode manipular é até 20 vezes menor que o do YAC. Essa é a diferença entre os sistemas vetoriais YAC e BAC. Atualmente, o BAC é mais preferido do que o YAC nos laboratórios.

Referências
1. Shero, J. H., M. K. McCormick, S. E. Antonarakis e P. Hieter. "Vetores de cromossomos artificiais de levedura para manipulação e mapeamento de clones eficientes." Genomics.U.S. Biblioteca Nacional de Medicina, junho de 1991. Web. 25 Mar. 2017
2. Ramsay, M. "Clonagem artificial de cromossomos para leveduras". Biotecnologia molecular. U.S. National Library of Medicine, abril de 1994. Web. 25 Mar. 2017

Cortesia da imagem:
1. "Vetores de clonagem de BACs Chem114A" Por Tinastella - (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia