Diferença entre nitrocelulose e membrana de nylon

Diferença-chave - Nitrocelulose vs Membrana de Nylon
 

A mancha é uma técnica importante para a detecção de seqüências específicas de DNA, RNA e proteínas de suas misturas na biologia molecular. Isso é feito usando uma membrana chamada borrão. Existem diferentes técnicas de manchas, como as manchas norte, sul e oeste. A seleção de uma membrana adequada para o processo de mancha deve ser feita com cuidado para evitar ligações inespecíficas e detecções incorretas. Nitrocelulose, nylon e PVDF são membranas comumente usadas em técnicas de transferência. Eles têm características diferentes. A principal diferença entre nitrocelulose e membrana de nylon é que membranas de nitrocelulose têm alto potencial de imobilização protéica enquanto que membranas de nylon têm alto potencial de imobilização de ácidos nucleicos. No entanto, ambos os tipos de membranas são freqüentemente usados ​​em técnicas de transferência.

CONTEÚDO
1. Visão geral e principais diferenças
2. O que é uma membrana de nitrocelulose
3. O que é uma membrana de nylon
4. Comparação lado a lado - nitrocelulose vs membrana de nylon
5. Resumo

O que é uma membrana de nitrocelulose?

A membrana de nitrocelulose é um filtro de membrana comumente usado em técnicas de transferência de ácidos nucleicos e proteínas. Tem um alto potencial de ligação às proteínas. Portanto, as membranas de nitrocelulose são amplamente utilizadas na técnica de Western blotting. As membranas de nitrocelulose são compatíveis com todas as técnicas de hibridação e mostram capacidades superiores de ligação sem interferências. As membranas de nitrocelulose são naturalmente hidrofílicas por natureza. Eles fazem a interação hidrofílica com as moléculas e as imobilizam eficientemente na membrana. As membranas comerciais de nitrocelulose estão disponíveis em dois tamanhos de poro: 0,45 e 0,2 µm.

Figura 01: Membrana de nitrocelulose usada no western blotting

O que é uma membrana de nylon?

A membrana de nylon é outro tipo de membrana comercial usada em técnicas de transferência. Alternativamente, é usado com membranas de nitrocelulose para manchas no sul e no norte. As membranas de nylon são ideais para a mancha do sul do que a nitrocelulose devido à sua alta afinidade com a ligação ao DNA. Devido a várias características únicas das membranas de nylon, os pesquisadores geralmente usam membranas de nylon para manchas no sul e no norte, em vez de sobre a membrana de nitrocelulose. Membranas de nylon também são recomendadas para decapagem e verificação, ao contrário da nitrocelulose.

Figura 02: Membrana de nylon usada para manchas no sul

Qual é a diferença entre nitrocelulose e membrana de nylon?

Nitrocelulose vs Nylon Membrane
Membranas de nitrocelulose são quebradiças.	Membranas de nylon são menos quebradiças.
Manipulação
Eles são difíceis de manusear.	Eles são fáceis de manusear.
Reprobing
Membranas de nitrocelulose não suportadas são difíceis de reter.	A reprovação é fácil com membranas de nylon.
Compatibilidade com várias condições de armazenamento
As membranas de nitrocelulose têm menos resistência para suportar várias condições de armazenamento.	As membranas de nylon respondem de maneira mais robusta a várias condições de armazenamento.
Usar
É necessário pré-molhar.	Não é necessário pré-molhar as membranas de nylon.
Natureza hidrofílica
As membranas de nitrocelulose são de natureza hidrofílica, mas são menos hidrofílicas que as de nylon.	Eles são altamente hidrofílicos por natureza.
Potencial de imobilização
Membranas de nitrocelulose têm menos afinidade por ácidos nucleicos. Mas tem uma alta afinidade por proteínas.	As membranas de nylon têm um alto potencial de ligação com ácidos nucleicos que as membranas de nitrocelulose.

Resumo - Nitrocelulose vs Nylon Membrane

Membranas de nitrocelulose e nylon são folhas especiais usadas na técnica de borrar para reproduzir o padrão de bandas no gel. Eles permitem a possibilidade de detectar uma sequência específica ou uma proteína das misturas, imobilizando-as na membrana. Uma vez que as moléculas são imobilizadas na membrana, ela pode ser usada como substrato para análise de hibridação com sondas marcadas. A membrana de nitrocelulose é comumente usada para detecção de proteínas na técnica de Western blotting devido à sua alta afinidade de ligação com proteínas. Membranas de nylon são frequentemente usadas para manchas no sul e no norte. Essa é a diferença entre nitrocelulose e membrana de nylon.

Referências:
1. Hayes, P. C., C. R. Wolf e J. D. Hayes. "Técnicas de mancha para o estudo de DNA, RNA e proteínas." BMJ: British Medical Journal. U.S. National Library of Medicine, 14 de outubro de 1989. Web. 07 Abr. 2017
2. Mahmood, Tahrin e Ping-Chang Yang. "Western Blot: técnica, teoria e resolução de problemas". Revista Norte-Americana de Ciências Médicas. Medknow Publications & Media Pvt Ltd, setembro de 2012. Web. 07 Abr. 2017

Cortesia da imagem:
1. “Transferência Western Blot” Por Bensaccount na Wikipedia em inglês (CC BY 3.0) via Commons Wikimedia