Diferença entre imunocitoquímica e imuno-histoquímica

Diferença chave - Imunocitoquímica vs Imuno-histoquímica
 

A imunocitoquímica (ICC) e a imuno-histoquímica (IHC) são duas técnicas amplamente utilizadas no diagnóstico molecular, que identificam e confirmam a ocorrência de doenças não transmissíveis e doenças transmissíveis baseadas nos marcadores moleculares presentes nas células. A principal diferença imunocitoquímica e imuno-histoquímica é a molécula usada como procedimento de análise nessas técnicas. Na CCI, são utilizados anticorpos primários e secundários conjugados com marcadores como a fluorescência, enquanto IHC, anticorpos monoclonais e policlonais são utilizados para as determinações diagnósticas..

CONTEÚDO

1. Visão geral e principais diferenças
2. O que é imunocitoquímica
3. O que é imuno-histoquímica
4. Semelhanças entre imunocitoquímica e imuno-histoquímica
5. Comparação lado a lado - imunocitoquímica versus imuno-histoquímica em forma de tabela
6. Resumo

O que é imunocitoquímica (ICC)?

O ICC usa anticorpos primários e secundários ligados a marcadores, como marcadores fluorescentes ou enzimas, e é um método de detecção poderoso para detectar antígenos presentes nas células alvo, que podem ser partículas celulares infecciosas ou células tumorais cancerígenas. Três tipos de controles são necessários para a imunocitoquímica.

• Anticorpo Primário - controle que mostra a especificidade da ligação do anticorpo primário ao antígeno
• Anticorpo Secundário - controle que mostra que o rótulo é específico para o anticorpo primário
• Controles de etiqueta - mostra que a rotulagem é o resultado da etiqueta adicionada e não o resultado da rotulagem endógena.

Figura 01: A imunocitoquímica rotula proteínas individuais dentro das células (aqui, a tirosina hidroxilase nos axônios dos neurônios autonômicos simpáticos é mostrada em verde).

O controle primário de anticorpos é específico para cada novo anticorpo e não pode ser repetido para cada experimento. O controle secundário de anticorpos é projetado com base no anticorpo primário utilizado na experiência e é incluído em cada experiência. O controle de rotulagem é incluído se uma condição do procedimento for alterada, a amostra for alterada ou quando for encontrada uma rotulagem inesperada.

As duas principais aplicações do ICC são o Radio Immuno - Assay (RIA) e o Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). O anticorpo mais comum usado é a imunoglobulina G.

O que é imuno-histoquímica (IHC)?

Na imuno-histoquímica, a amostra fonte contém anticorpos monoclonais e policlonais para determinar a presença de antígenos em células estranhas. Esta técnica é baseada na reação específica da ligação antígeno-anticorpo. Os anticorpos utilizados na detecção podem ser marcados com diferentes marcadores; eles podem ser marcadores de fluorescência, marcadores radiomarcados ou marcadores químicos. Através da facilitação em vitro a ligação entre o antígeno e o anticorpo alvo, a presença ou a ausência de uma proteína específica de uma célula pode ser determinada.

Figura 02: Coloração imuno-histoquímica do rim normal com CD10

Atualmente, os cientistas estão envolvidos no desenvolvimento de anticorpos-alvo para antígenos específicos presentes nas células que podem se desenvolver como células tumorais malignas ou antígenos presentes em agentes infecciosos, como o HIV.

Quais são as semelhanças entre imunocitoquímica e imuno-histoquímica?

• As reações são altamente específicas e precisas no ICC e IHC.
• As aplicações do ICC e do IHC incluem diagnóstico de câncer e doenças infecciosas.
• As condições estéreis devem ser mantidas nas duas condições e devem ser realizadas em em vitro
• Ambas as técnicas fornecem resultados reproduzíveis.
• Ambos são rápidos.
• Rotulagem de rádio, técnicas de fluorescência são usadas como métodos de detecção tanto no ICC quanto no IHC.
• Ambos são baseados no emparelhamento antígeno-anticorpo.

Qual é a diferença entre imunocitoquímica e imuno-histoquímica?

Imunocitoquímica (ICC) vs Imuno-histoquímica (IHC)
O ICC usa marcadores ligados a anticorpos primários e secundários, como marcadores fluorescentes ou enzimas, e é um método de detecção poderoso para detectar antígenos presentes nas células alvo.	IHC é um método que utiliza anticorpos monoclonais e policlonais para determinar a presença de antígenos que são marcadores especiais de proteínas colocados na superfície celular.
Origem da amostra
Amostras derivadas de tecidos que foram processados ​​histologicamente em seções finas são usadas no ICC.	A IHC utiliza amostras constituídas por células cultivadas em uma monocamada ou células em suspensão que são depositadas em uma lâmina.
Processamento de amostras
No ICC, as células devem ser permeáveis ​​para facilitar a penetração de anticorpos nos alvos intracelulares.	Na IHC, as células são fixadas em formalina, embebidas em parafina antes da coloração.

Resumo - Imunocitoquímica vs Imuno-histoquímica

O diagnóstico molecular é usado para identificar e confirmar a ocorrência de doenças não transmissíveis e doenças transmissíveis com base nos marcadores moleculares presentes nas células. Marcadores moleculares podem ser proteínas ou sequências de DNA ou RNA; o desenvolvimento de tecnologias como o ICC e o IHC abriu caminho para os cientistas identificarem a doença e sua causa em um estágio inicial. Tanto o ICC quanto o IHC dependem das reações específicas entre anticorpo e antígeno, embora a fonte da amostra. A principal diferença entre imunocitoquímica e imuno-histoquímica é o processamento da amostra dos dois procedimentos.

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Referências:

1. Burry, Richard W. "Controles para imunocitoquímica: uma atualização". Jornal de Histoquímica e Citoquímica, Publicações SAGE, janeiro de 2011, disponível aqui. Acessado em 24 de agosto de 2017.
2. Duraiyan, Jeyapradha, et al. "Aplicações de imuno-histoquímica." Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Publicações Medknow & Media Pvt Ltd, agosto de 2012, disponível aqui. Acessado em 24 de agosto de 2017.

Cortesia da imagem:

1. "Immunohistochemistry" Por Swharden - Trabalho próprio (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. “Kidney cd10 ihc” Por Nephron - Trabalho próprio (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia