Diferença entre HPLC e LCMS

Diferença de chave - HPLC vs LCMS
 

Vamos primeiro examinar o significado de HPLC e LCMS antes de analisar a diferença entre HPLC e LCMS. A cromatografia é uma técnica de separação em análises químicas em que os constituintes da amostra são separados durante a passagem por um meio cromatográfico. Também envolve interação com a amostra, fase estacionária e fase móvel. HPLC significa Cromatografia líquida de alta performance, e é usado como método de cromatografia líquida em química analítica. A combinação de Cromatografia Líquida e Espectroscopia de Massa (LCMS) foi desenvolvido para a análise quantitativa de biomoléculas selecionadas e é um procedimento de teste altamente sensível, preciso e específico em comparação com a HPLC. Isto é o diferença chave entre HPLC e LCMC. Este artigo apresentará a HPLC e LCMC que lidam com análises químicas e discutem as diferenças entre HPLC e LCMS.

O que é HPLC?

A cromatografia líquida de alta performance (HPLC) é uma popular técnica de separação em química analítica. É principalmente usado para separar os componentes, para identificar e quantificar cada componente em uma mistura. Anteriormente, esse método era conhecido como cromatografia líquida de alta pressão porque dependia das bombas fluir um solvente líquido pressurizado compreendendo a mistura de amostra através de uma coluna embalada com um material adsorvente sólido. Cada um dos constituintes da mistura de amostra interage de maneira diferente com o material adsorvente sólido, o que resulta em diferentes taxas de fluxo para diferentes constituintes. Isso pode levar à separação dos constituintes à medida que fluem pela coluna de HPLC.

A HPLC tem sido usada por vários formulários tal como análise dos níveis de vitamina D no sangue, uso ilegal de drogas por atletas detectando os resíduos de drogas na urina, separar os constituintes de uma amostra biológica complexa para fins de pesquisa e análise e fabricação de produtos farmacêuticos.

O que é LCMS?

A cromatografia líquida-espectrometria de massa (LCMS) é uma técnica analítica que combina as habilidades de separação física da cromatografia líquida com as habilidades de análise de massa da espectrometria de massa (EM). A cromatografia líquida é uma técnica de separação e a espectrometria de massa é usada para analisar a razão massa / carga das partículas carregadas. A separação física é geralmente obtida por HPLC e, alternativamente, LCMS também conhecido como HPLC-MS. LCMS é um técnica analítica dominante que tem um precisão, sensibilidade e especificidade muito altas comparado com HPLC. Assim, é útil em muitas aplicações, como fins de pesquisa, análise de medicamentos, análise de alimentos, etc. O LCMS é principalmente usado para separar, detectar, identificar e quantificar propriedades bioquímicas de uma amostra específica na presença de misturas químicas complexas.

Qual é a diferença entre HPLC e LCMC?

Acrônimo e definição de HPLC e LCMC

HPLC: HPLC significa Cromatografia Líquida de Alto Desempenho. É uma técnica de separação usada principalmente para separar os componentes, para identificar e quantificar cada componente em uma mistura.

LCMS: LCMS significaCromatografia Líquida e Espectrometria de Massa. É uma técnica analítica que combina as habilidades de separação física da cromatografia líquida com as habilidades de análise de massa da espectrometria de massa (EM).

Características de HPLC e LCMC

Classificação

HPLC: Este é apenas um método de Cromatografia Líquida.

LCMS: Esta é uma combinação do método de Cromatografia Líquida e do método de Espectrometria de Massa.

Eficiência

HPLC: Comparado ao LCMS, a análise por HPLC é menos eficiente e mais lenta.

LCMS: Comparada à HPLC, a análise LCMS é eficiente e mais rápida.

Sensibilidade

HPLC: Comparado ao LCMS, a análise por HPLC é menos sensível.

LCMS: Comparada à HPLC, a análise LCMS é mais sensível.

Especificidade

HPLC: Comparada ao LCMS, a análise por HPLC é menos específica.

LCMS: Comparada à HPLC, a análise LCMS é mais específica.

Precisão

HPLC: A HPLC fornece resultados menos precisos que o LCMS para a determinação de alguns produtos químicos.

LCMS: LCMS fornece resultados mais precisos que o HPLC para a determinação de alguns produtos químicos.

Componente

HPLC: A HPLC pode ser considerada como um componente do LCMS.

LCMS: LCMS não pode ser considerado como um componente da HPLC.

Fonte de íons

HPLC: A fonte de íons não existe no instrumento HPLC.

LCMS: A fonte de íons está presente no instrumento LCMS.

Formulários

HPLC: Íons, polímeros, moléculas orgânicas e biomoléculas podem ser analisados ​​usando HPLC.

LCMS: Moléculas orgânicas e biomoléculas podem ser analisadas. Ao contrário do HPLC, o LCMS pode ser usado para examinar misturas incompletamente resolvidas.

Operação

HPLC: O diagrama de um instrumento de HPLC é apresentado na figura 1 e geralmente inclui um amostrador automático, bombas e um detector. O amostrador introduz a mistura da amostra na fase móvel (mistura pressurizada de solventes como água, acetonitrila e / ou metanol), que a transfere para a coluna. As bombas fornecem o fluxo e a composição desejados da fase móvel através da coluna. A coluna é preenchida com o adsorvente, que é uma partícula sólida granulada, como sílica ou polímeros. O detector produz um sinal proporcional à quantidade de presença de constituinte da amostra na coluna, permitindo, portanto, uma análise quantificável dos constituintes da amostra selecionados. O instrumento HPLC é controlado e a análise de dados é fornecida por um microprocessador digital e software do usuário.

Figura 1: Diagrama do instrumento HPLC

LCMS: O diagrama do instrumento LCMS é apresentado na figura 2. O extrato da amostra é inserido na coluna que consiste em HPLC. Esta coluna retém os metabólitos da amostra com base em caracteres físicos e diferentes metabólitos fluem para o espectrômetro de massa em diferentes intervalos de tempo. A espectroscopia de massa é usada para avaliar massas de partículas, para determinar o arranjo elementar de uma molécula e para clarificar as estruturas das moléculas. No entanto, a amostra deve ser ionizada para gerar moléculas carregadas, a fim de determinar suas proporções massa-carga. Portanto, em vez de instrumentos de HPLC, o LCMS consiste em três módulos adicionais, como fonte de ferro, um analisador de massa e um detector. Uma fonte de íons pode transformar a amostra da fase gasosa em íons e um analisador de massa agrupando os íons por suas massas usando campos eletromagnéticos. Finalmente, um detector quantifica os valores e fornece dados de cada íon presente na amostra. A técnica LCMS pode ser usada para aplicações qualitativas e quantitativas.

  Figura 2: Diagrama do instrumento LCMS

Em conclusão, a HPLC é um método de cromatografia líquida, enquanto LCMS é uma combinação de cromatografia líquida e espectrometria de massa. Ambas as técnicas de análise têm características diferentes, mas podem ser usadas para identificar e quantificar composições de alimentos, produtos farmacêuticos e outras moléculas bioativas.

Referências Arpino, P. (1992). Espectrometria de massa de cromatografia líquida combinada. Parte III Aplicações de termopulverização. Comentários Espectrometria de Massa, 11: 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. e Spoendlin, C. (2004). Aspectos práticos da cromatografia líquida de alta performance de fase reversa rápida usando colunas compactadas com partículas de 3μm e colunas monolíticas no desenvolvimento e produção farmacêuticos, trabalhando sob as boas práticas atuais de fabricação. Journal of Chromatography, 1036 (2): 127-133. Lee, M. S. e Kerns, E. H. (1999). Aplicações de LC / MS no desenvolvimento de medicamentos. Comentários Espectrometria de Massa, 18 (3-4): 187-279. Murray, K. K. (1997). Acoplamento de dessorção / ionização a laser assistida por matriz a separações de líquidos. Comentários Espectrometria de Massa 16 (5): 283. Cortesia da imagem: “Hplc” de Original Uploader foi Kjaergaard em en.wikipedia - Transferido de en.wikipedia. (Domínio Público) via Commons