Diferença entre HPLC e HPTLC

Diferença de chave - HPLC vs HPTLC
 

A principal diferença entre HPLC e HPTLC é que A HPLC permite a separação quantitativa dos componentes em uma amostra, enquanto a HPTLC não permite a separação quantitativa dos componentes em uma amostra.

A cromatografia é um método de separação física usado para separar e identificar os componentes em uma mistura. Tanto a HPLC como a HPTLC são técnicas cromatográficas. HPLC é cromatografia líquida de alta eficiência. HPTLC é cromatografia de camada fina de alto desempenho.

CONTEÚDO

1. Visão geral e principais diferenças
2. O que é HPLC
3. O que é HPTLC
4. Comparação lado a lado - HPLC vs HPTLC em forma de tabela
5. Resumo

O que é HPLC?

HPLC é cromatografia líquida de alta performance. É uma técnica analítica usada para separar, identificar e quantificar componentes em uma mistura. Nesta técnica, a amostra é dissolvida em um solvente adequado. Em seguida, o solvente com a amostra é passado através de uma bomba com uma pressão determinada. A bomba é preenchida com material adsorvente sólido. Em seguida, alguns componentes se ligam fortemente ao material absorvente, enquanto outros se ligam livremente. Isso faz com que os componentes tenham taxas de fluxo diferentes através da bomba. Portanto, os componentes podem ser separados facilmente.

Figura 01: Um sistema HPLC

O material adsorvente que enche a bomba é conhecido como fase estacionária. O solvente com a amostra dissolvida é conhecido como fase móvel. A bomba usada nesta técnica é chamada de coluna. A coluna é preenchida com um material adsorvente, mais comumente, partículas de sílica. O tamanho dessas partículas pode variar de 2-50 μm. O processo de separação é afetado pela composição da fase móvel e pela temperatura do sistema. As interações entre a fase estacionária e o componente na amostra podem ser interações hidrofóbicas, interações dipolo-dipolo, ligação iônica, etc..

A pressão de operação do HPLC é consideravelmente mais alta que a da cromatografia líquida tradicional. Encontra-se em torno de 50-350 bar. A diferença entre cromatografia líquida e HPLC é que, na cromatografia líquida, a amostra cai através da coluna sob gravidade, enquanto que, na HPLC, a amostra é pressurizada através da coluna. O tamanho da coluna e as partículas absorventes também são muito pequenas quando comparadas à cromatografia líquida tradicional. No entanto, a resolução dada pela técnica HPLC é superior.

O que é HPTLC?

HPTLC é cromatografia de camada fina de alto desempenho. É a forma avançada e automatizada de TLC tradicional. Essa técnica fornece uma resolução eficiente em um curto período de tempo. Nesse método de análise, a amostra e uma referência podem ser analisadas ao mesmo tempo, o que permite que a amostra seja comparada com a referência. Proporciona uma precisão analítica aprimorada do que outras técnicas cromatográficas. O tempo necessário para a análise é menor. A técnica é uma técnica de baixo custo.

Figura 02: Uma análise de corantes alimentares usando HPTLC

O método HPTLC é um processo simples e a etapa de preparação da amostra também é eliminada (na TLC tradicional, a etapa de preparação da amostra é incluída antes da separação. Essa etapa envolve limpeza e enriquecimento). O solvente pode ser usado diretamente sem qualquer pré-tratamento, embora outras técnicas cromatográficas exijam pré-tratamentos, como desgaseificação, filtração, etc..

O material adsorvente usado no HPTLC é a sílica com tamanhos de partículas muito pequenos. Na TLC tradicional, o tamanho de partícula da sílica é de 5-20 μm, enquanto que no HPTLC é de 4-8 μm. A amostra é aplicada à placa HPTLC usando um aplicador. Dá uma aplicação uniforme e segura. Em seguida, as placas são colocadas em uma câmara com a fase móvel. A câmara deve estar saturada com o vapor da fase móvel. Após o processo HPTLC, os pontos que foram movidos podem ser detectados. Ao detectar os pontos na placa, a técnica HPTLC usa uma região UV adequada ou uma câmara de iodo.

Qual é a diferença entre HPLC e HPTLC?

HPLC vs HPTLC
HPLC é cromatografia líquida de alta eficiência.	HPTLC é cromatografia de camada fina de alto desempenho.
Técnica
Na HPLC, a fase móvel com o solvente é passada através de uma coluna preenchida com a fase estacionária.	No HPTLC, a amostra é manchada em uma placa de TLC e colocada dentro de uma câmara que contém a fase móvel; a amostra pode migrar para cima da placa junto com a fase móvel.
Medição
Na HPLC, as diferenças entre as taxas de fluxo dos componentes através da coluna são usadas para separar os componentes na amostra.	No HPTLC, as diferenças entre as distâncias percorridas por cada componente na amostra são usadas para separar os componentes na amostra.
Separação quantitativa
A HPLC permite a separação quantitativa dos componentes em uma amostra.	HPTLC não permite separação quantitativa de componentes em uma amostra.

Resumo - HPLC vs HPTLC

HPLC e HPTLC são duas técnicas cromatográficas. A principal diferença entre HPLC e HPTLC é que o HPLC permite a separação quantitativa dos componentes em uma amostra, enquanto o HPTLC não permite a separação quantitativa dos componentes em uma amostra.

Referência:

1. "Cromatografia Líquida de Alto Desempenho". Wikipedia, Wikimedia Foundation, 10 de abril de 2018, disponível aqui.
2. "HPTLC". SlideShare SlideShare, 30 de maio de 2011, disponível aqui.

Cortesia da imagem:

1. "HPTLCplatetoMS" Por Kjaergaard na Wikipedia em inglês - Transferido de en.wikipedia para o Commons (domínio público) via Commons Wikimedia
2. "Hplc" Por PD Dr. rer. nat. habil. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito de um método de controle de qualidade de alimentos, utilizando-se o método de análise quantitativa, utilizando-se os métodos de análise quantitativa e quantitativa.