Diferença entre Gram Stain e Cultura

Diferença chave - Gram Stain vs Culture
 

A coloração de Gram é uma técnica de coloração que é realizada para diferenciar bactérias em dois grupos de acordo com a espessura da camada de peptidoglicano em sua parede celular. A cultura é um método de cultivo e manutenção de microrganismos em condições de laboratório para diferentes análises. A principal diferença entre a mancha de gramas e a cultura é sua função; Gram estirpe uma técnica de coloração de bactérias onde a cultura é um método de crescimento e manutenção de microrganismos.

CONTEÚDO
1. Visão geral e principais diferenças
2. O que é Gram Stain
3. O que é cultura
4. Comparação lado a lado - Gram Stain vs Culture
5. Resumo

O que é Gram Stain?

A coloração de Gram é uma importante técnica de coloração diferencial usada para identificação bacteriana em Microbiologia. Esta técnica foi introduzida pelo bacteriologista dinamarquês Hans Christian Gram em 1884. A coloração de Gram categoriza as bactérias em dois grupos principais: gram positivo e gram negativo; estes são muito importantes na classificação e identificação bacteriana. A coloração de Gram é realizada como um passo inicial para a caracterização bacteriana.

As bactérias são agrupadas com base nas diferenças na parede celular. As bactérias Gram-positivas contêm uma camada espessa de peptidoglicano em sua parede celular, enquanto as bactérias Gram-negativas contêm uma camada fina de peptidoglicano em sua parede celular, como mostrado na figura 01. O resultado da coloração de Gram será baseado na diferença de espessura na camada de peptidoglicano da parede celular. parede celular.

Figura 1: Bactérias Gram-positivas e bactérias Gram-negativas

A coloração de gramas é realizada usando quatro reagentes diferentes, a saber; mancha primária, mordente, agente descolorante e contra-mancha. A violeta de cristal e a safranina servem como manchas primárias e contrárias, respectivamente, enquanto as gramas de iodo e álcool a 95% servem como mordente e descolorante, respectivamente.

Etapas básicas da mancha de grama

  1. Um esfregaço bacteriano é preparado em uma lâmina de vidro limpa, fixada a quente e resfriada.
  2. A mancha é inundada com violeta de cristal por 1-2 minutos.
  3. O esfregaço é lavado com água da torneira lenta para remover manchas em excesso.
  4. Gramas de iodo é aplicado ao esfregaço por 1 minuto.
  5. O esfregaço é lavado com água da torneira lenta
  6. O esfregaço é lavado com álcool a 95% por 2 a 5 segundos e lavado com água corrente da torneira lenta.
  7. O esfregaço é corado com safranina por 1 minuto
  8. O esfregaço é lavado com água corrente lenta, seco e observado ao microscópio.

No final da coloração de Gram, as bactérias Gram-negativas serão observadas na cor rosa, enquanto as bactérias Gram-positivas serão observadas na cor púrpura, como mostrado na Figura 02. O resultado da mancha de gramas é decidido pela espessura da camada de peptidoglicano na sua parede celular. Durante a etapa de descoloração, a mancha primária e o mordente são facilmente removidos das bactérias gram-negativas e tornam-se incolores, uma vez que possuem uma fina camada de peptidoglicano. A mancha primária é retida nas bactérias gramas positivas, uma vez que possuem uma espessa camada de peptidoglicano. A coloração contrária não será eficaz para bactérias gram positivas devido à retenção da mancha primária. Assim, gramas de bactérias positivas serão visíveis na cor primária da mancha, ou seja, na cor roxa. A coloração contrária mancha as bactérias gram-negativas e fica visível na cor escolhida, que é a cor safranina. Portanto, é fácil categorizar as bactérias em dois grupos pela coloração de Gram e é valioso na diferenciação e identificação bacteriana..

Figura 2: Tensão de Gram

O que é cultura?

A cultura microbiana é um método de cultura e manutenção de microrganismos em condições de laboratório para diferentes fins. As culturas são cultivadas em meio sólido, semi-sólido e líquido, com base no tipo e na finalidade da cultura de microrganismos. As culturas são fornecidas com os nutrientes necessários e as condições de crescimento exigidas pelos microorganismos. Existem diferentes componentes de um meio de cultura, como fonte de energia, fonte de carbono, fonte de nitrogênio, minerais, micronutrientes, água, agente solidificante, etc. Temperatura, oxigênio e pH ótimos devem ser ajustados de acordo com o tipo de microrganismo cultivado.

Existem diferentes tipos de culturas microbianas; por exemplo, cultura em lote, cultura contínua, cultura de facadas, cultura de placas de ágar, cultura de caldo, etc. De acordo com a composição do meio de crescimento, existem diferentes tipos de meios de cultura conhecidos como meios sintéticos, meios semi-sintéticos e meios naturais. As culturas microbianas são preparadas em condições estéreis dentro de uma câmara especial chamada fluxo de ar laminar. O meio de crescimento e o material de vidro são esterilizados antes da inoculação do microorganismo desejado. Sob condições estéreis adequadas, o microorganismo alvo é transferido para o meio nutriente esterilizado e incubado à temperatura ideal. Dentro do meio, o microorganismo crescerá e se multiplicará usando os nutrientes fornecidos.

Figura 3: Uma cultura bacteriana na placa

Qual é a diferença entre Gram Stain e Culture?

Gram Stain vs Culture

Grams strain é uma técnica de coloração diferencial usada para diferenciação e identificação bacteriana. A cultura microbiana é um método de cultivo de microrganismos em laboratório.
Componentes
Utiliza reagentes diferentes, incluindo duas manchas. Utiliza diferentes meios de cultura, como sólidos, semi-sólidos e líquidos, compostos por nutrientes e outras condições necessárias.
Funções básicas
Isso permite o agrupamento de bactérias em dois grupos: gramas negativos e gramas positivos. Isso permite a multiplicação de microrganismos para diferentes fins.
Base 
O resultado da coloração de Gram é baseado nas diferenças na camada peptidoglicana da parede celular.  Os microrganismos crescerão e se multiplicarão dentro dos meios de cultura.
Resultado
Gramas de bactérias negativas são visíveis na cor rosa e gramas de bactérias positivas são visíveis na cor roxa. Em placas, colônias dos microrganismos podem ser vistas. Em meios líquidos, os microorganismos estão em forma suspensa.

Resumo - Gram Stain vs Culture

As culturas microbianas são preparadas e mantidas em condições de laboratório para diferentes fins, como armazenamento, testes, purificação química, etc. A coloração de Gramas é um procedimento de coloração que diferencia as bactérias em dois grupos principais chamados bactérias gram-negativas e bactérias gram-positivas. Portanto, a diferença entre a mancha de gramas e a cultura é que a mancha de gramas é uma técnica de coloração de bactérias, enquanto a cultura é um método de crescimento e manutenção de microrganismos nos laboratórios.

Referência:
1. Aryal, Sagar. "Coloração de Gram: Princípio, Procedimento, Interpretação, Exemplos e Animação." Notas on-line de microbiologia. N.p., 20 de setembro de 2015. Web. 01 Mar. 2017.
2. "Cultura microbiológica". Wikipedia. Fundação Wikimedia, 01 de fevereiro de 2017. Web. 01 Mar. 2017
3. Kumar, Sabarish. "Quais são as técnicas básicas da cultura microbiana?" Quais são as técnicas básicas da cultura microbiana? N.p., n.d. Rede. 01 Mar. 2017

Cortesia da imagem:
1. Graevemoore Inglês Vikipeediast (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. “Gram Strain” Por Y tambe - arquivo de Y tambe (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
3. "Cultura do antraz" Por Instituto de Pesquisa Médica do Exército dos EUA de Doenças Infecciosas foto - (Domínio Público) via Commons Wikimedia