Electroforese vs Electroosmosis
Métodos de separação física como filtragem, destilação, cromatografia em coluna não são métodos fáceis quando se trata de separação de algumas moléculas. Eletroforese e eletro-osmose são duas outras técnicas de separação que podem ser usadas para separar partículas carregadas.
O que é eletroforese?
A eletroforese é uma técnica de separação de moléculas com base em seus tamanhos. Fundamental para essa separação é a carga da molécula e sua capacidade de se mover em um campo elétrico. Essa é a técnica mais comum e principal em biologia molecular para separar moléculas, especialmente DNA e proteínas. Isso é usado principalmente porque é relativamente fácil e barato. O aparelho para eletroforese pode ser um pouco complicado, e sua preparação leva algum tempo. Mas podemos facilmente fazer um aparelho de eletroforese a partir das coisas que temos no laboratório. As técnicas de eletroforese podem variar de acordo com nossos propósitos. Podemos usar eletroforese unidimensional para a separação de DNA ou proteína. A eletroforese bidimensional é usada quando são necessárias mais amostras resolvidas (como no caso da impressão digital). Um gel é usado como meio de suporte para separar as moléculas. Este gel pode ser preparado como folhas planas ou em tubos. A base deste procedimento é separar as moléculas, dependendo de sua taxa de movimento através de um gel, quando um campo elétrico é fornecido. Moléculas carregadas negativamente como o DNA tendem a viajar em direção ao pólo positivo neste campo elétrico, enquanto moléculas carregadas positivamente tendem a viajar para o pólo negativo. Dois tipos de géis são usados na eletroforese como agarose e poliacrilamida. Esses dois têm poderes de resolução diferentes. O gel atua como uma peneira para filtrar os diferentes tamanhos de moléculas. As cargas eletrostáticas estabelecidas no gel atuam como força.
A separação depende da mobilidade dos íons.
F = fv = ZeE
V = ZeE / f
F = força que age sobre uma partícula
f = coeficiente de atrito
V = velocidade média de migração
Z = carga da partícula migratória
e = carga elementar
E = força do campo elétrico
As condições necessárias para a eletroforese são relativamente simples. Ao fazer o gel e executar a amostra, um tampão é usado. Marcadores e corantes são usados para fins de visualização.
O que é eletro-osmose?
Este é o processo de mover um líquido através de um material usando um campo elétrico aplicado. O movimento pode ser através de um material poroso, ao longo de um capilar, membrana etc. Isso pode ser usado como uma técnica de separação (especialmente a osmose capilar). A velocidade do líquido é linearmente proporcional ao campo elétrico aplicado. Também depende do material usado para construir o canal e a solução usada. Na interface, solução e material obtiveram cargas opostas e isso é conhecido como uma dupla camada elétrica. Quando um campo elétrico é aplicado à solução, a dupla camada elétrica se move pela força resultante de Coulomb. Isso é conhecido como fluxo eletro-osmótico.
Qual é a diferença entre Eletroforese e Eletro-osmose? • Na eletroforese, partículas sólidas (macromoléculas como ácidos nucleicos ou proteínas) são movidas usando um campo elétrico. Mas na eletro-osmose um líquido está se movendo. • Na eletroforese, o material sólido de suporte é um gel. Mas eletro-osmose pode ser um gel, membrana, capilar, etc. |