Diferença entre Bradford e Lowry Protein Assay

o diferença chave entre Bradford e Lowry Protein Assay é que O teste de proteína de Bradford baseia-se no desvio de absorvância do corante Coomassie blue G-250 brilhante, enquanto o teste de proteína de Lowry baseia-se na reação de íons de cobre (Cu +) produzidos pela oxidação de ligações peptídicas com o reagente Folin-Ciocalteu.

Um ensaio é uma técnica analítica que ajuda a caracterizar os principais componentes funcionais de uma amostra. Portanto, um ensaio pode ser um teste qualitativo ou quantitativo. Muitos campos, incluindo medicina laboratorial, farmacologia, biologia ambiental, biologia molecular, bioquímica e imunologia, usam esse tipo de teste rotineiramente. O ensaio de proteína de Bradford e Lowry são dois ensaios bioquímicos que determinam a concentração de proteína em uma solução de amostra. Ambos os ensaios usam técnicas colorimétricas para fornecer resultados.

CONTEÚDO

1. Visão geral e principais diferenças
2. O que é o Bradford Protein Assay
3. O que é o ensaio de proteína Lowry
4. Semelhanças entre Bradford e Lowry Protein Assay
5. Comparação lado a lado - Bradford vs Lowry Protein Assay em forma de tabela
6. Resumo

O que é o Bradford Protein Assay?

O teste de proteína de Bradford é um procedimento analítico espectroscópico rápido para análise de proteínas. Ele mostra alta precisão ao medir a concentração de proteína em uma solução. Marion Bradford introduziu este procedimento em 1976. Neste ensaio, a reação total é baseada na composição de aminoácidos das proteínas medidas. Em outros termos, o ensaio de proteína Bradford é um ensaio colorimétrico. Ele usa o corante Coomassie azul brilhante. Portanto, este ensaio de proteína colorimétrica depende da mudança de absorvância do corante. O azul brilhante Coomassie G-250 existe em três formatos: catiônico (vermelho), aniônico (azul) e neutro (verde). Durante condições ácidas, a forma vermelha do corante é convertida em azul. Confirma a ligação da proteína. Se a proteína não estiver presente, a solução pode permanecer na cor marrom.

Figura 01: Ensaio de proteína Bradford

O ensaio de proteína de Bradford difere de outros ensaios de proteína, uma vez que é menos suscetível a interferências de vários compostos químicos presentes na solução de proteína. Esses compostos incluem sódio, potássio, glicose e sacarose, etc..

O que é o ensaio de proteína Lowry?

O teste de proteína Lowry é um teste bioquímico usado para determinar o nível total de proteína em uma solução. Oliver H. Lowry é a pessoa que desenvolveu este reagente em 1940. O procedimento descreve a concentração total de proteínas da solução por uma mudança de cor proporcional à concentração de proteínas na solução. Portanto, este também é um ensaio de proteína colorimétrica.

A reação entre os íons cobre (Cu +) produzida pela oxidação das ligações peptídicas e o reagente Folin-Ciocalteu é a base deste procedimento. Além disso, este reagente contém ácido fosfomolibdico e ácido fosforotungstico. No entanto, o mecanismo de reação do ensaio de proteína Lowry não é bem conhecido. Mas envolve a oxidação dos resíduos de cisteína, triptofano e tirosina pela redução do reagente Folin-Ciocalteu.

Figura 02: Teste de proteína Lowry

Os resíduos de cisteína contribuem para a absorvância observada no ensaio da proteína Lowry e a reação resulta em uma molécula azul brilhante; heteropólio azul de molibdênio. A redução desta molécula é medida por absorvância a 660 nm. Portanto, a concentração de resíduos de cisteína e triptofano que reduziram o reagente Folin-Ciocalteu deduz a concentração total da proteína na solução.

Quais são as semelhanças entre Bradford e Lowry Protein Assay?

• Os ensaios de proteína de Bradford e Lowry determinam a concentração de proteína em uma solução.
• Ambos os métodos são métodos colorimétricos.
• Além disso, a sensibilidade dos dois métodos é alta.

Qual é a diferença entre Bradford e Lowry Protein Assay?

Os ensaios de proteína de Bradford e Lowry são dois tipos de ensaios que determinam a concentração de proteínas em uma solução. O ensaio da proteína Bradford baseia-se na alteração da absorvância do corante Coomassie blue G-250 brilhante, enquanto o ensaio da proteína Lowry depende da reação dos íons de cobre produzidos pela oxidação das ligações peptídicas, com o reagente Folin-Ciocalteu. Portanto, esta é a principal diferença entre o ensaio de proteína Bradford e Lowry. O teste de proteína Bradford leva 15 minutos para produzir um resultado, enquanto o teste de proteína Lowery leva 40-60 minutos para produzir um resultado. Assim, esta é outra diferença entre o ensaio de proteína Bradford e Lowry. Além disso, o ensaio de proteína Bradford depende da composição de aminoácidos, enquanto o ensaio de proteína Lowry é parcialmente dependente da composição de aminoácidos. Portanto, essa também é uma diferença entre o ensaio de proteína Bradford e Lowry.

Abaixo, inforaphic fornece mais detalhes sobre a diferença entre o ensaio de proteína Bradford e Lowry.

Resumo - Bradford vs Lowry Protein Assay

Um ensaio é uma técnica analítica usada para caracterizar o principal componente funcional de uma amostra. Os ensaios de proteína de Bradford e Lowry são dois tipos de ensaios de proteínas que funcionam sob técnicas colorimétricas. Os ensaios de proteína de Bradford e Lowry determinam a concentração de proteína em uma solução. No entanto, a principal diferença entre Bradford e Lowry Protein Assay reside na técnica colorimétrica que eles usam. O teste de proteína Bradford usa o azul brilhante Coomassie G-250, enquanto o teste de proteína Lowry usa íons cobre (Cu +) e íons Folin-Ciocalteu. Além disso, o método Bradford fornece resultados rápidos do que o ensaio de proteína Lowry. No entanto, ambos os métodos são altamente sensíveis e estão sujeitos a interferências de várias substâncias.

Referência:

1. "Canadian Journal of Botany". Canadian Journal of Botany - 60 (7): 1046 - PDF, Disponível aqui.
2. "Química de ensaios de proteínas". Thermo Fisher Scientific - EUA, disponível aqui.

Cortesia da imagem:

1. "Bradford protein assay" Por Helito - Trabalho próprio (CC BY-SA 4.0) via Commons Wikimedia