Diferença entre Transfecção Transiente e Estável

Diferença de chave - Transfecção transiente x estável
 

A transfecção é um processo envolvido na transferência gênica de células eucarióticas usando métodos químicos ou físicos. A transfecção pode ser classificada nos dois principais tipos denominados transfecção transitória e transfecção estável. Durante a transfecção transitória, o gene de interesse falha na integração com o genoma do hospedeiro e é expresso temporalmente no hospedeiro por um curto período, enquanto que, na transfecção estável, o gene de interesse se integra ao genoma do hospedeiro e é sustentado por um longo período em várias gerações.s. Esta é a principal diferença entre transfecção transitória e estável. Nos dois casos, a transfecção é bem sucedida e os genes são expressos.

CONTEÚDO
1. Visão geral e principais diferenças
2. O que é Transfecção Transiente
3. O que é Transfecção Estável
4. Comparação lado a lado - Transição transitória versus estável
5. Resumo

O que é Transfecção Transiente?

A transfecção é uma ferramenta importante para inserir genes em células eucarióticas. Entre os dois tipos de transfecção, a transfecção transitória é uma maneira comum na transferência de genes. Através de um vetor, genes estranhos são transformados dentro das células hospedeiras. Uma vez que o DNA estranho entra na célula hospedeira, ele tem duas opções. Ele pode integrar-se ao genoma do host e replicar-se ou permanecer dentro dele sem integrar no genoma. A transfecção transitória exibe a expressão temporária dos genes inseridos sem integrar no genoma do hospedeiro. Os genes expressam e produzem a proteína codificada até a célula se dividir. No entanto, devido à incapacidade de integração, ele não pode se replicar e entrar nas gerações futuras. Esse tipo de transfecção é bem-sucedido por um curto período de tempo. Durante a divisão celular ou devido a alguns outros fatores, o DNA estranho é submetido à degradação. A transfecção transitória é mostrada quando o DNA estranho está na forma de DNA altamente enrolado.

Figura 01: Transição transitória

O que é Transfecção Estável?

A transfecção estável mostra uma integração bem sucedida de genes estranhos no genoma do hospedeiro. Uma vez que o DNA estranho entra no interior da célula hospedeira, parte do DNA estranho se integra ao genoma do hospedeiro e se torna parte dele. Portanto, o DNA estranho também se replica e passa para as gerações futuras quando o genoma do hospedeiro se replica. Este tipo de transfecção é complexo e raro. No entanto, devido à transfecção estável no genoma, essa característica é mantida por um período mais longo de várias gerações.

A transfecção estável é um processo difícil e requer uma entrega eficaz de DNA e a aquisição celular do DNA estranho em seu genoma. Portanto, o DNA linear favorece a transfecção estável do que o DNA circular. Contudo, a taxa estável de transfecção é de aproximadamente um em cada 10⁴ células transformadas. A transfecção estável pode ser observada pela cotransfomação de um marcador selecionável e pela seleção artificial em um meio.

Figura 02: Transfecção estável

Qual é a diferença entre Transfecção transitória e estável?

Transfecção transitória vs estável
DNA estranho não se integra a um genoma hospedeiro.	O DNA estranho se integra ao genoma do hospedeiro e se torna parte dele.
Replicação no host
Os genes transientemente transfectados não se replicam dentro do hospedeiro. Portanto, os genes não são passados ​​para as próximas gerações.	Os genes são replicados no host e transmitidos para as gerações futuras.
Duração da expressão gênica
Os genes são expressos por um período de tempo finito e, depois disso, são destruídos.	Os genes se tornam parte do genoma e são expressos na geração por um longo período de tempo.
Usar
Isso é útil para estudar os efeitos da expressão de curto prazo de genes ou produtos gênicos.	Isso é útil para estudar os efeitos das expressões genéticas a longo prazo.
Detecção da Transfecção
Os genes são expressos e podem ser facilmente detectados através da inserção de um gene repórter.	A transfecção estável pode ser facilmente detectada inserindo um marcador selecionável e selecionando através de seleção artificial na mídia.
Ocorrência e Processo
A transfecção transitória é comum e não é complexa para realizar.	A transfecção estável é rara na ocorrência e complexa para realizar.
Natureza do DNA
DNA altamente superenrolado são adequados para transfecção transitória.	DNA linear é adequado para transfecção estável.
Formulários
Isso é usado para estudos de knockdown de genes ou silenciamento com RNAs inibidores, produção de proteínas em pequena escala	Isso é usado para a produção de proteínas em estudos farmacológicos em larga escala e de longo prazo, terapia gênica, pesquisa sobre os mecanismos de regulação genética de longo prazo

Resumo - Transfecção transitória vs estável

Transfecções transitórias e estáveis ​​são dois tipos de transfecções mostradas durante a transferência do gene para células eucarióticas por sistemas não virais. O DNA estranho transformado não é integrado ao genoma do hospedeiro na transfecção transitória, enquanto se integra ao genoma do hospedeiro na transfecção estável. O DNA enrolado circular é mostrado na transfecção transitória, enquanto o DNA linear prefere a transfecção estável. Esta é a diferença entre transfecção transitória e estável. Contudo, a transfecção transitória é mais comum e fácil quando comparada à transfecção estável. Mas a seleção de um entre dois depende do objetivo da transferência de genes e da duração do projeto de pesquisa..

Referências:
1. Condreay, J. Patrick, Sam M. Witherspoon, William C. Clay e Thomas A. Kost. "Expressão genética transitória e estável em células de mamíferos transduzidas com um vetor de baculovírus recombinante." Anais da Academia Nacional de Ciências dos Estados Unidos da América. Academia Nacional de Ciências, 5 de janeiro de 1999. Web. 25 Mar. 2017
2. Kim, Tae Kyung e James H. Eberwine. "Transfecção de células de mamíferos: o presente e o futuro." Química Analítica e Bioanalítica. Springer-Verlag, agosto de 2010. Web. 25 Mar. 2017