Recombinação e transformação são duas etapas cruciais na engenharia genética, onde as características de um organismo são deliberadamente modificadas pela manipulação de seu material genético. A recombinação é um processo no qual o DNA estranho é incorporado em um genoma de vetor e a molécula de DNA recombinante é formada. A transformação é o próximo passo no qual a molécula recombinante é inserida no organismo hospedeiro. A célula hospedeira ou o organismo facilita a expressão da molécula recombinante. A principal diferença entre transformantes e recombinantes é que os transformantes são as células ou os organismos que levam a molécula recombinante para dentro e facilitam a expressão enquanto recombinantes são os vetores que permitem a inserção do DNA estranho em seu genoma e o transporte em transformantes hospedeiros para expressão.
CONTEÚDO
1. Visão geral e principais diferenças
2. O que são Transformantes
3. O que são recombinantes
4. Comparação Lado a Lado - Transformantes x Recombinantes
5. Resumo
Transformantes são as células ou os organismos nos quais o DNA recombinante é absorvido para a expressão. As bactérias são comumente usadas como organismos hospedeiros na engenharia genética, pois são fáceis de cultivar, multiplicar e manipular em condições de laboratório, e o processo de transformação é fácil em comparação com outros organismos. A bactéria hospedeira mais popular usada na engenharia genética é a bactéria E coli.
Durante o processo de transformação, as células hospedeiras são induzidas a absorver os recombinantes. No entanto, algumas células hospedeiras não absorvem moléculas recombinantes. Eles são conhecidos como não-transformantes e as células que contêm moléculas de DNA recombinante no seu interior são conhecidas como transformantes. A seleção de transformantes a partir de não transformantes é feita usando marcadores selecionáveis em biologia molecular. Marcadores selecionáveis são inseridos no genoma do vetor junto com a inserção do DNA. Marcadores selecionáveis comumente usados são genes resistentes a antibióticos. Os genes marcadores facilitam a diferenciação dos transformantes e continuam o processo. Após o processo de transformação, a bactéria é cultivada em um meio contendo antibióticos. Somente os transformantes são capazes de crescer nesse meio, pois possuem os recombinantes dentro.
Uma vez que a molécula de DNA recombinante é transformada no interior do organismo hospedeiro, o DNA estranho pode ser integrado ao genoma da célula hospedeira ou permanecer não integrado no citoplasma. No entanto, a expressão e a replicação do DNA estranho ocorrem no organismo hospedeiro e produzem o resultado desejado do processo.
Um recombinante é um organismo ou uma célula que possui genoma recombinado contendo DNA estranho. Os recombinantes são resultado do processo de engenharia genética. Eles são construídos artificialmente em vitro inserindo os genes de interesse e modificando o genoma. Frequentemente, plasmídeos bacterianos e bacteriófagos agem como recombinantes na engenharia genética. Possui quimera de diferentes DNAs. Molécula de DNA recombinante transporta DNA estranho para o organismo hospedeiro e o faz expressar e formar o produto desejado.
As moléculas recombinantes são construídas usando endonucleases de restrição e ligases de DNA. O fragmento de DNA desejado é separado do organismo original e inserido no vetor para produzir o recombinante para transformação. O corte do gene de interesse e a abertura do organismo vetorial deve ser feito usando a mesma enzima de restrição para criar extremidades adesivas compatíveis para uni-las. Uma vez que o DNA estranho é incorporado ao genoma do vetor, ele é conhecido como molécula de DNA recombinante ou recombinante..
Figura 02: DNA recombinante
Transformantes vs Recombinantes | |
Transformantes são as células que possuem molécula de DNA recombinante dentro. | Recombinantes são as moléculas transportadoras que possuem DNA estranho inserido no próprio genoma. |
Expressão de DNA estranho | |
São as células hospedeiras capazes de expressar o DNA recombinante. | Eles devem poder se auto-replicar dentro do organismo hospedeiro. |
Seleção | |
As células que podem ser facilmente cultivadas e multiplicadas são selecionadas como células hospedeiras. | Eles devem ser facilmente extraíveis e devem conter marcadores selecionáveis. |
Transformantes são as células ou organismos com moléculas de DNA recombinante dentro delas. Os recombinantes são os organismos ou as células que sofreram recombinação genética e possuem DNA estranho em seus genomas. As células bacterianas são frequentemente utilizadas como células hospedeiras para transformação e os plasmídeos e os bacteriófagos são frequentemente utilizados como vetores na tecnologia de DNA recombinante. Esta é a diferença entre transformantes e recombinantes.
Referências:
1. Griffiths, Anthony JF. "Fazendo DNA recombinante." Uma introdução à análise genética. 7ª edição. Biblioteca Nacional de Medicina dos EUA, 01 de janeiro de 1970. Web. 08 Abr. 2017
2. Cooper, Geoffrey M. "DNA recombinante". A célula: uma abordagem molecular. 2ª edição. Biblioteca Nacional de Medicina dos EUA, 01 de janeiro de 1970. Web. 08 Abr. 2017
Cortesia da imagem:
1. “Formação recombinante de plasmídeos” Por Minestrone Soup na Wikipedia em inglês (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia