A purificação de anticorpos IgG, suas subclasses e outros tipos de imunoglobulinas (IgA, IgE, IgD e IgM) têm sido realizadas geralmente usando proteínas bacterianas que possuem alta afinidade para a região Fc desses anticorpos. As proteínas A e G são proteínas recombinantes bacterianas altamente recomendadas para a purificação de imunoglobulinas IgG humanas e de outros animais. E também a proteína A, proteína G, proteína A / G e proteína L são proteínas recombinantes microbianas nativas que possuem locais de ligação específicos para a região Fc dos anticorpos IgG de mamíferos. Fora isso, essas proteínas microbianas também podem ser usadas para purificar outros tipos de imunoglobulinas, como IgA, IgE, IgD e IgM em mamíferos e outros animais, como coelho, camundongo, ovelha, vaca etc. A proteína A se liga a anticorpos humanos que não Anticorpo IgG. Mas é fraca ligação com IgG humana3 subclasse e não se liga ao anticorpo humano IgD. A proteína G se liga a todos os subtipos de anticorpos IgG humanos e é mais versátil quando se liga a anticorpos IgG de outras espécies. No entanto, a proteína G não se liga a outros tipos de anticorpos humanos além da IgG. A proteína G tem uma maior afinidade para IgG do que a proteína A. Isto é o diferença chave entre a proteína A e a proteína G.
1. Visão geral e principais diferenças
2. O que é proteína A
3. O que é proteína G
4. Semelhanças entre a proteína A e a proteína G
5. Comparação lado a lado - proteína A versus proteína G em forma de tabela
6. Resumo
A proteína A é definida como uma proteína de superfície com tamanho de 42 kDa. A proteína A é originalmente encontrada na parede celular de Staphylococcus aureus. É codificado pelo gene "spa". A proteína A é regulada pela topologia do DNA, osmolaridade celular e um sistema de dois componentes. Essa proteína recombinante microbiana está altamente envolvida nas reações bioquímicas, devido à sua capacidade de se ligar a vários tipos de anticorpos, como IgG, IgA, IgE e IgM. Portanto, essa proteína microbiana é usada para purificar os tipos de anticorpos humanos. Possui cinco domínios de ligação "Ig" homólogos que se dobram em feixes de três hélices. Cada domínio é capaz de se ligar a proteínas de imunoglobulina de muitas espécies de mamíferos, principalmente com anticorpos IgG. A proteína A se liga especificamente à cadeia pesada da região Fc da maioria das imunoglobulinas.
No que diz respeito às proteínas da família VH3 humana, a proteína A se liga à região Fab. A proteína recombinante A é mais ampla em sua capacidade de se ligar a outros anticorpos humanos (IgA, IgE, IgM) que não o anticorpo IgG. Mas é fraco com IgG humana3 subclasse e não se liga ao anticorpo humano IgD. A proteína A também é capaz de se ligar a anticorpos IgG de outras espécies, como cavalo, coelho, rato, cachorro, macaco, vaca etc..
Figura 01: Proteína A
A proteína A desempenha um papel central na Staphylococcus aureus patogênese. Esta proteína facilita a ligação de bactérias à superfície revestida pelo fator Von-Willebrand humano. Assim, está aumentando a eficiência da infecção bacteriana. A proteína A também prejudica a imunidade mediada pelo humor humano. Essa proteína recombinante microbiana é produzida através do processo de fermentação industrial.
A proteína G é definida como a proteína de ligação à imunoglobulina que expressa especificamente pelas bactérias estreptocócicas dos grupos C e D. Possui alta afinidade para as regiões Fc e Fab dos anticorpos. A proteína G possui aproximadamente 65kDa de tamanho molecular.
A proteína G é uma proteína de superfície. Devido à sua afinidade de ligação às imunoglobulinas, é utilizado para purificação de anticorpos. A proteína G se liga a todos os subtipos de anticorpos IgG humanos e é mais versátil quando se liga a anticorpos IgG de outras espécies. Mas não se liga a outros tipos de anticorpos humanos (IgA, IgE, IgM, IgD). O dobramento dos domínios da proteína G - B1 resulta em uma proteína globular.
Proteína A vs Proteína G | |
A proteína A é definida como uma proteína de superfície de tamanho de 42 kDa que é originalmente encontrada na parede celular de Staphylococcus aureus. | A proteína G é definida como uma proteína de ligação à imunoglobulina de superfície de tamanho de 65kDa, expressa especificamente pelas bactérias estreptocócicas do grupo C e D. |
Expressando o tipo bacteriano | |
A proteína A é expressa por Staphylococcus aureus | A proteína G é expressa pelas bactérias estreptocócicas dos grupos C e D. |
Tamanho molecular | |
A proteína A tem um tamanho de 42kDa. | A proteína G tem tamanho aproximado de 65kDa (proteína G148 G-65kDa e proteína C40 G-58kDa). |
Vinculação à albumina sérica humana | |
A proteína A não se liga à albumina sérica. | A proteína G possui locais de ligação para a albumina sérica. |
Purificação de IgG humana3 Subclasse | |
A proteína A não pode ser usada para purificação da IgG humana3 subclasse, pois não se liga à IgG humana3 imunoglobulina da subclasse. | A proteína G pode ser usada para purificação da IgG humana3 subclasse, uma vez que se liga à IgG humana3 imunoglobulina da subclasse. |
Purificação de outros anticorpos humanos (IgA, IgE e IgM) | |
A proteína A tem uma capacidade mais alta de se ligar a outros anticorpos humanos que não o anticorpo IgG. Portanto, pode ser usado para purificar outros anticorpos humanos, como; IgA, IgE e IgM. | A proteína G se liga a todos os subtipos de anticorpos IgG humanos. Mas a proteína G não se liga a outros anticorpos humanos como; IgA, IgE e IgM. Portanto, não pode ser usado para purificar outros anticorpos humanos, como; IgA, IgE e IgM |
A proteína recombinante microbiana A, proteína G, proteína A / G e proteína L são proteínas bacterianas nativas que possuem locais de ligação específicos para a região Fc dos anticorpos IgG de mamíferos. A proteína A e a proteína G também possuem locais de ligação para os outros anticorpos IgG de outras espécies. A proteína A e a proteína G são proteínas recombinantes bacterianas que são altamente recomendadas para fins de purificação de imunoglobulinas IgG humanas e de outros animais. A proteína L tem alta afinidade para as cadeias leves kappa das classes de imunoglobulina IgG, IgA e IgM. Assim, a proteína L pode ser incorporada para purificar esses tipos de imunoglobulinas em humanos e outras espécies. Industrialmente, todas essas proteínas bacterianas estão usando atualmente para purificar imunoglobulinas como; IgG, IgA, IgD, IgE e IgM. Isso pode ser descrito como a diferença entre a proteína A e a proteína G.
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1. "Proteína A." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 26 de dezembro de 2017. Disponível aqui
2. "Proteína G." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 16 de dezembro de 2017. Disponível aqui
1.'Proteína A 1DEE 1L6X'By E A S - Obra própria, (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia