Os microrganismos são cultivados em laboratórios e indústrias para diversos fins, como caracterização, diferenciação, identificação, desenvolvimento de antibióticos, desenvolvimento de vacinas, produção de plantas e animais transgênicos (OGM) e extração de ácidos orgânicos. São cultivadas em meios de cultura sintetizados artificialmente ou em substratos naturais. Portanto, diferentes tipos de meios frescos estéreis devem ser preparados, e os microorganismos desejados são cultivados em culturas puras ou mistas. Os meios são suplementados com todos os nutrientes necessários para o crescimento do microrganismo. A ação de introduzir o microrganismo no meio ou substrato fresco é conhecida como inoculação. No entanto, as condições ideais de crescimento devem ser fornecidas para alcançar um crescimento suficiente do microrganismo. O processo de fornecer as condições de crescimento necessárias, como temperatura, umidade e pH, e permitir que os microrganismos cresçam na mídia, é conhecido como incubação. Assim, a principal diferença entre inoculação e incubação é que inoculação é a introdução de microrganismos nos meios de cultivo ou substratos enquanto a incubação está permitindo que os microrganismos cresçam sob as condições de crescimento fornecidas.
1. Visão geral e principais diferenças
2. O que é inoculação
3. O que é Incubação
4. Comparação lado a lado - inoculação vs incubação em forma de tabela
5. Resumo
A inoculação é o processo de introdução de microrganismos em um meio de cultivo que é adequado ao seu crescimento. Por outras palavras, a inoculação pode ser definida como o processo que introduz um microrganismo patogénico ou antigénico num organismo vivo, a fim de estimular a produção de anticorpos. Quando a inoculação é concluída, os microorganismos começam a crescer e a se multiplicar no meio, formando colônias visíveis.
Existem diferentes tipos de ferramentas e técnicas de inoculação usadas em microbiologia. Alça de inoculação, agulha de inoculação, cotonetes, pinças, preaders de vidro, pipetas dispensadoras são as ferramentas de inoculação mais usadas em laboratórios. Todos esses materiais devem estar livres de contaminantes. Portanto, antes da inoculação, é necessário esterilizá-los usando uma técnica de esterilização adequada para evitar contaminações ou o crescimento de microorganismos indesejados nos meios de cultura. Método de placa de raia, método de espalhamento, método de vazamento, inoculação pontual, facada, cultura inclinada são várias técnicas de inoculação usadas em laboratórios microbianos para cultivar bactérias e fungos.
Figura 01: Inoculação de bactéria usando a técnica de placa de estrias
Os microrganismos têm diferentes requisitos de crescimento. Eles devem receber os nutrientes necessários, água, minerais, fatores de crescimento, oligoelementos e outras condições de crescimento. Após a inoculação de um micróbio em um meio fresco, as condições de crescimento devem ser mantidas para apoiar o crescimento do microrganismo. O processo de permitir que os microorganismos cresçam em um meio, fornecendo as condições de crescimento necessárias, é conhecido como incubação. Placas de cultura inoculadas podem ser colocadas dentro de um dispositivo chamado incubadora para incubação. As incubadoras são projetadas de forma que o operador possa controlar a temperatura, a umidade, as concentrações de gases, etc., conforme o requisito do micróbio.
Quando são fornecidas condições ótimas, os microorganismos tendem a crescer, se reproduzir e se multiplicar utilizando os nutrientes disponíveis no meio. O crescimento microbiano tem quatro fases distintas em um meio de cultura. Após a inoculação, eles iniciam o fase de atraso. Durante a fase de atraso, os micróbios não mostram um rápido crescimento ou multiplicação. Eles começam a se adaptar ao novo ambiente e se estabilizam lá. Uma vez ajustados, a segunda fase, que mostra um crescimento exponencial do microorganismo, inicia. A segunda fase é conhecida como fase de log ou fase exponencial. Durante a fase logarítmica, os micróbios mostram taxa de crescimento e multiplicação ideais. A terceira fase começa após a fase logarítmica, quando os nutrientes e outros requisitos são limitados no meio. Durante o fase estacionária, as taxas de crescimento e morte morrem, e a curva de crescimento é uma linha reta paralela ao eixo x. A quarta fase é a fase da morte onde a taxa de mortalidade excede a taxa de crescimento. Após vários dias, o crescimento microbiano cessa, deixando para trás uma cultura morta.
Figura 02: Incubadora de placas microbianas
Inoculação vs Incubação | |
A inoculação é o processo de introdução de microrganismos ou suspensão de microrganismos em um meio de cultura. | A incubação é o processo de permitir que os microrganismos inoculados cresçam sob as condições de crescimento necessárias. |
Ferramentas usadas | |
A inoculação pode ser feita com agulhas de inoculação, alças de inoculação, swaps de algodão, pipetas, etc.. | A incubação pode ser feita em uma sala de cultura, incubadora, racks de cultura, etc.. |
Tempo | |
A inoculação é realizada dentro de um curto período de tempo. | A incubação leva várias horas a dias. |
Condições mantidas | |
A inoculação é feita sob condições assépticas dentro de um gabinete de ar laminar. | A incubação é feita fornecendo condições de crescimento adequadas, como temperatura, umidade, concentração de oxigênio, luz, etc.. |
Inoculação e incubação são duas etapas principais envolvidas na cultura de microrganismos em laboratórios. Inoculação é a ação de introduzir microorganismos em um meio ou substrato de cultura adequado. Os meios inoculados são fornecidos com condições de crescimento adequadas para crescer e multiplicar. Este processo é conhecido como incubação. Esta é a principal diferença entre inoculação e incubação. Existem ferramentas e equipamentos especiais em laboratórios microbianos para fins de incubação. A incubadora é um dispositivo que permite que os microrganismos cresçam sob temperatura controlada, aeração, umidade etc. A inoculação e a incubação devem ser realizadas seguindo condições assépticas adequadas para evitar contaminações e perda de tempo.
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1. “EXPERIMENTOS PARA MOSTRAR O CRESCIMENTO DAS BACTÉRIAS - técnicas básicas.” Técnicas microbiológicas - o básico. N.p., n.d. Rede. Disponivel aqui. 07 de junho de 2017.
2. “Taxa de crescimento e temperatura - livro aberto sem limites”. Sem limites. Sem limites, 17 de agosto de 2016. Web. Disponivel aqui. 07 de junho de 2017.
1. “Placas de raia” (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. “Incubadora de placas microbiológicas-02” Por nome real: Matylda Sękpl.wiki: Cygaretkacommons: Cygaretka - Trabalho próprio (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia