o diferença chave entre HPLC e HPLC rápido é que a pressão da bomba que usamos para HPLC é de cerca de 40 MPa enquanto a pressão da bomba para HPLC rápido é de cerca de 3-5 MPa.
A técnica mais comum que usamos para separar os componentes de uma mistura é a "cromatografia líquida". Existem várias técnicas para atingir esse objetivo, das quais a HPLC é muito popular. HPLC significa Cromatografia Líquida de Alto Desempenho que identifica, quantifica e separa componentes de uma mistura líquida de maneira rápida e eficiente. O HPLC rápido é uma aplicação especial do HPLC que chamou a atenção dos envolvidos no estudo de soluções..
1. Visão geral e principais diferenças
2. O que é HPLC
3. O que é HPLC rápido
4. Comparação lado a lado - HPLC vs HPLC rápido em forma de tabela
5. Resumo
HPLC é cromatografia líquida de alta eficiência. Ele faz uso de alta pressão para empurrar solventes para que eles passem através de uma coluna. Além disso, é uma maneira ideal de separar e estudar vários compostos, como aminoácidos, ácidos nucléicos, carboidratos, esteróides, antibióticos e hidrocarbonetos. A HPLC tem muitas vantagens sobre outros métodos de separação de misturas, como alta resolução e análise mais rápida. Oblitera a necessidade de reembalagem e regeneração e oferece melhor controle sobre os parâmetros, aumentando assim a eficiência da separação. Idealmente, a HPLC é adequada para aplicações em larga escala, pois pode separar partículas muito pequenas e permite o uso de altas pressões que facilitam o fluxo de solventes com facilidade.
Figura 01: Coluna HPLC
Em resumo, o método de operação da técnica de HPLC é o seguinte. Primeiro, devemos introduzir a amostra no fluxo da fase móvel em pequenas quantidades discretas usando uma bomba. A pressão da bomba deve ser mantida em 40 MPa. Este fluxo de fase móvel penetra através da coluna de HPLC. Em seguida, os componentes na amostra também passam pela coluna. No entanto, suas velocidades de movimento diferem entre si devido à diferença nas interações entre os componentes da amostra e o adsorvente dentro da coluna. Chamamos isso de adsorvente como fase estacionária, porque reside dentro da coluna (sem se mover). Em seguida, no final da coluna, podemos coletar a amostra que elui da coluna, assim, podemos coletar os componentes na amostra separadamente.
Recentemente, cientistas do instituto de pesquisa Schering Plough desenvolveram uma técnica rápida de HPLC que é uma versão avançada do HPLC, pois permite uma separação ainda mais rápida dos compostos de uma mistura. Além disso, conhecida como HPLC rápida, essa técnica utiliza partículas de sílica de núcleo fundido de 2,7 um que são produzidas pela fusão de sílica porosa de 0,5 um sobre uma partícula de sílica sólida. Essas partículas produzidas com exclusividade tornam o processo de separação muito rápido e também com baixa contrapressão do que o que usamos em HPLC.
Figura 02: Aparelho FPLC
A HPLC rápida obtém resultados comparáveis aos da UPLC, mas os cientistas consideram que essa técnica é superior, pois não requer equipamentos de alta pressão muito caros. O que é ótimo é que o HPLC rápido não requer novos protocolos de laboratório.
HPLC é cromatografia líquida de alta performance e HPLC rápida é uma forma avançada de cromatografia líquida de alta performance. A principal diferença entre HPLC e HPLC rápido é que a pressão da bomba que usamos para HPLC é de cerca de 40 MPa. Considerando que, a pressão da bomba para HPLC rápida é de cerca de 3-5 MPa. Além disso, podemos separar diferentes compostos, como aminoácidos, ácidos nucléicos, carboidratos, esteróides, antibióticos e hidrocarbonetos, usando a técnica de HPLC, enquanto a técnica rápida de HPLC é usada principalmente para a separação de proteínas.
O infográfico abaixo apresenta mais informações sobre a diferença entre HPLC e HPLC rápido.
HPLC é uma técnica de cromatografia líquida que se tornou muito popular em todo o mundo. HPLC rápido é uma nova versão do HPLC, os pesquisadores do Schering Plough Institute desenvolveram essa nova técnica. A principal diferença entre HPLC e HPLC rápido está na pressão da bomba que usamos para a separação. Isso é; a pressão da bomba que usamos para HPLC é de cerca de 40 MPa. Mas, a pressão da bomba para HPLC rápida é de cerca de 3-5 MPa.
1. "Cromatografia Líquida de Alto Desempenho". Wikipedia, Wikimedia Foundation, 20 de outubro de 2018. Disponível aqui
"Você precisa de um sistema sofisticado para executar HPLC rápido - ou precisa?" HPLC rápido - CHROMacademy. Disponivel aqui
1. ”HPLC kolom” Door Jmave, rcvanwijk - Eigen werk, (Domínio Público) via Commons Wikimedia
2. "FPLC do laboratório" Por Stephen Helms de Dallas, TX, Estados Unidos - FPLC do nosso laboratório (CC BY-SA 2.0) via Commons Wikimedia