No contexto da microscopia, a coloração é considerada uma etapa essencial durante o aprimoramento do contraste da imagem microscópica, especialmente para destacar diferentes estruturas nos tecidos biológicos. Durante a coloração de sangue periférico e esfregaços de medula óssea, são utilizadas as manchas de Wright e Giemsa. Essas manchas são conhecidas como manchas de Romanowsky. Ambas as manchas são compostas de componentes importantes: azul oxidado de metileno, eosina Y e corantes B azuis. A função do azul de metileno e do azul B é manchar o núcleo com cores variando de azul a roxo. Essas manchas são amplamente utilizadas durante o estudo da morfologia dos glóbulos vermelhos e durante a realização de contagens diferenciais de glóbulos brancos. O diagnóstico de diferentes doenças, como a leucemia, pode ser alcançado através dos procedimentos de coloração de Romanowsky. A coloração de Wright é usada para diferenciar as células sanguíneas, que consistem em uma mistura de corantes de eosina e azul de metileno. A coloração de Giemsa é utilizada durante a coloração de células bacterianas, bem como células humanas, e pode ser combinada com a coloração de Wright para desenvolver a coloração de Giemsa Wright. Esta é a principal diferença entre a mancha Giemsa e a mancha Wright.
A coloração de Giemsa é usada para citogenética e diagnóstico histopatológico de parasitas da malária e outras doenças parasitárias. A mancha de Giemsa também pode ser considerada como uma mancha básica na classificação de linfomas na classificação de Kiel. A coloração de Giemsa é necessária para a faixa de Giemsa, que é comumente conhecida como banda G. A bandagem de Giemsa é usada para colorir os cromossomos e também para criar cariogramas. Anormalidades cromossômicas, como translocações e rearranjos, são identificadas através da bandagem de Giemsa. A coloração Giemsa é usada em histologia devido à sua coloração de alta qualidade da membrana nuclear e cromatina, à metacromasia de alguns componentes celulares e às diferentes qualidades da coloração citoplasmática com base no tipo de célula.
Figura 01: Giemsa Stain
A solução Giemsa contém azul de metileno, Azure B e eosina e a mancha é preparada comercialmente com o uso de pó de Giemsa. A estabilidade da mancha depende do azul de metileno e de sua mistura juntamente com o azul de metileno, que forma um eosinato. A coloração de Giemsa é específica para os grupos fosfato na cadeia de DNA e é ligada às áreas em que existe uma grande quantidade de ligações adenina-timina. No método de coloração Giemsa, uma fina camada da amostra é colocada inicialmente em uma lâmina microscópica, juntamente com algumas gotas de metanol puro por cerca de 30 segundos. Em seguida, a lâmina é imersa em solução de 5% de corante Giemsa, que é preparada de fresco, por cerca de 20 a 30 minutos. Finalmente, a lâmina é lavada com água da torneira e deixada para secar. A mancha de Giemsa é conhecida como mancha diferencial porque a mancha de Wright-Giemsa é formada quando a mancha de Wright é combinada com Giemsa. Portanto, ele pode ser usado no estudo de bactérias patogênicas ligadas às células humanas. Aqui, as células humanas e as células bacterianas são coradas deferencialmente e as cores púrpura e rosa são observadas respectivamente.
A mancha de Wright recebeu o nome de James Homer Wright, que modificou a mancha de Romanowsky. A mancha de Wright é usada para diferenciar os tipos de células sanguíneas, pois ajuda a distinguir entre os tipos de células sanguíneas. Como resultado, as infecções podem ser diagnosticadas observando a contagem de glóbulos brancos. A mancha é uma mistura de eosina, de cor vermelha, e corantes de azul de metileno. A mancha de Wright é usada para manchar e observar amostras de urina, esfregaços de sangue periférico e aspirados de medula óssea sob microscópios de luz. A coloração de Wright é usada na coloração de cromossomos em citogenética para promover o diagnóstico de várias doenças e síndromes. As amostras de urina coradas com a mancha de Wright identificam os eosinófilos indicando uma infecção do trato urinário.
Figura 02: Mancha de Wright
No processo de coloração de Wright, um filme de sangue seco ao ar é preparado e a mancha de Wright é aplicada e deixada por 3 minutos. Em seguida, é adicionado o tampão de uma quantidade igual da mancha, misturado suavemente e deixado por 5 minutos. A lâmina é mantida na horizontal e lavada bem com água destilada neutra. Por fim, é seco e observado ao microscópio.
Wright Stain vs Giemsa Stain | |
A coloração Giemsa é uma técnica de coloração diferencial usada principalmente para a coloração de células bacterianas e também de células humanas. | A coloração de Wright é uma técnica de coloração diferencial usada principalmente nos procedimentos de coloração de esfregaços de sangue, amostras de urina e aspirados de medula óssea. |
A coloração é uma técnica essencial de laboratório usada durante a microscopia, utilizada para aprimorar o contraste da imagem microscópica. As manchas Giemsa e Wright Stain, conhecidas como manchas de Romanowsky, envolvem a realização de contagens diferenciais de glóbulos brancos e o estudo da morfologia celular dos glóbulos vermelhos. Os corantes oxidados de azul de metileno, eosina Y e azure B são os componentes importantes das manchas de Romanowsky. Principalmente, a coloração Giemsa é utilizada durante a coloração de células bacterianas, mas também pode ser utilizada para células humanas. A coloração de Wright é amplamente utilizada durante a coloração de esfregaços de sangue, amostras de urina e aspirados de medula óssea. Essa é a diferença entre a mancha de Giesma e a de Wright.
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1. “Trypanosoma-evansi-sangue-rato-Giemsa-mancha” Por Alan R Walker - Trabalho próprio (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. “Mastócitos, medula óssea aspiram, Wright Stain (5916735712)” Por Ed Uthman de Houston, TX, EUA - Mastócitos, medula óssea aspiram, Wright StainUploaded by CFCF (CC BY 2.0) via Commons Wikimedia