Diferença entre o iniciador dianteiro e o reverso

Diferença de chave - Forward Reverse Primer vs
 

A reação em cadeia da polimerase (PCR) é um método de amplificação de DNA usado em aplicações biológicas moleculares. É uma técnica comumente usada que faz milhões a bilhões de cópias de uma sequência de DNA particularmente interessada. É um em vitro método realizado em laboratórios. A técnica de PCR é totalmente dependente da DNA polimerase produzida comercialmente chamada Taq polimerase. E também requer vários outros componentes e manutenção adequada da temperatura. Um componente importante são os primers. Primers são as sequências curtas de DNA projetadas especificamente para a sequência de DNA alvo. Eles geralmente têm cerca de 20 nucleotídeos de comprimento. A polimerase Taq catalisa a adição de nucleotídeos na sequência nucleotídica preexistente. Portanto, os primers são servidos como pontos de partida da síntese de novos fios. A polimerase Taq funciona apenas na direção 5 'a 3', portanto, a síntese de DNA ocorre na mesma direção 5 'a 3'. Como o DNA é de fita dupla, são necessários dois tipos de iniciadores na PCR. Eles são conhecidos como iniciador direto e iniciador reverso. Os iniciadores direto e reverso são denominados com base na direção do alongamento do iniciador no DNA quando ocorre a síntese do DNA. O iniciador direto emparelha com a fita de DNA anti-sentido e inicia a síntese da fita + ve do gene na direção 5 'para 3'. O iniciador reverso emparelha com a cadeia de sentido e inicia a síntese da cadeia complementar da cadeia de codificação; que é - coloca a cadeia do gene na direção 5 'a 3'. Isto é o diferença chave entre os primers direto e reverso.

CONTEÚDO

1. Visão geral e principais diferenças
2. O que é um Forward Primer
3. O que é um Primer Reverso
4. Semelhanças entre o iniciador direto e o reverso
5. Comparação lado a lado - iniciador dianteiro versus reverso em forma de tabela
6. Resumo

O que é um Forward Primer?

Orientação direta é a síntese da cadeia de codificação ou da cadeia de sentido de um gene. A polimerase Taq catalisa a síntese de uma nova fita na direção 5 'a 3'. A síntese da cadeia de codificação ocorre quando o iniciador emparelha com a cadeia não codificante ou anti-sentido e se alonga na direção de 5 'a 3'.

Figura 01: Primers para frente e reverso

O iniciador que emparelha com a cadeia anti-sentido ou a cadeia não codificante ou a cadeia modelo é conhecido como iniciador direto, pois o iniciador direto atua como um ponto de partida para a síntese da codificação ou da cadeia positiva do gene. O iniciador direto tem uma sequência nucleotídica curta que é complementar à extremidade flanqueadora 3 'da fita antisense. Hibrida com a fita anti-sentido e facilita a polimerase Taq para adicionar nucleotídeos que são complementares à fita modelo.

O que é um Primer Reverso?

O iniciador reverso é a sequência curta de DNA que se liga ao extremo 3 'da cadeia dos sentidos ou da cadeia de codificação. O iniciador reverso serve como ponto de partida para sintetizar uma cadeia complementar da sequência de codificação ou da sequência não codificante. O iniciador reverso é projetado complementar à extremidade 3 'da fita de codificação. Por isso, emparelha com a extremidade 3 'flanqueante da cadeia de codificação e permite que a polimerase Taq sintetize a cadeia anti-sentido ou a cadeia modelo. Como sua orientação é inversa, esse iniciador é rotulado como iniciador reverso.

Os iniciadores reverso e direto são importantes para a produção de milhões a bilhões de cópias de regiões específicas do DNA que são direcionadas ou interessadas.

Quais são as semelhanças entre o iniciador direto e o reverso?

• Os iniciadores Forward e Reverse são feitos a partir de oligonucleotídeos.
• Os iniciadores direto e reverso possuem uma sequência nucleotídica curta complementar às extremidades flanqueadoras das fitas duplas de DNA.
• Os iniciadores Forward e Reverse geralmente consistem em 20 nucleotídeos.
• Os Primers Forward e Reverse são usados ​​em reações em cadeia da polimerase.
• Os Primers Forward e Reverse são sintetizados comercialmente.
• Os primers Forward e Reverse são estáveis ​​em temperatura e normalmente têm Tm semelhante.
• Os Primers Forward e Reverse são recozidos com as sequências de DNA alvo.
• Os Primers Forward e Reverse são projetados de acordo com as reações de PCR.
• Os Primers Forward e Reverse são servidos como pontos de partida para a amplificação do DNA.
• Os iniciadores reverso e direto são importantes para a produção de milhões de cópias de regiões específicas de sequências de DNA direcionadas ou interessadas.

Qual é a diferença entre o Forward e o Reverse Primer?

Forward Primer vs Reverse Primer
O iniciador direto é a sequência curta de DNA que hibrida com a extremidade 3 'da não codificação ou com a cadeia molde do gene e serve como ponto de partida para sintetizar a sequência codificante.	O iniciador reverso é a sequência curta de DNA que hibrida com a extremidade 3 'da codificação ou a fita não modelo e serve como ponto de partida para sintetizar a sequência não codificante.
Fio de recozimento
O primer para frente recoze com fita de modelo.	O primer reverso recoze com o fio não modelo.
Nova sequência resultante
O iniciador direto facilita a síntese da sequência de codificação.	O iniciador reverso facilita a síntese da sequência não codificante.

Resumo - Encaminhar Reverse Primer vs

Existem dois tipos de iniciadores envolvidos na técnica de PCR. Eles são primers direto e reverso. Com base no alongamento do iniciador na síntese de novas cadeias de DNA, esses iniciadores são marcados ou nomeados. A polimerase Taq sintetiza o novo DNA na orientação 5 'a 3'. Portanto, os primers são projetados como complementares às extremidades 3 'dos ​​fios duplos. O iniciador direto que se alonga na direção de 5 'a 3' hibrida com a extremidade 3 'do anti-sentido ou o modelo ou a sequência não codificante. Serve como ponto de partida para sintetizar a sequência de codificação. O iniciador reverso que se alonga na direção de 5 'a 3' hibrida com a extremidade 3 'da codificação ou o não modelo ou a cadeia de sentido. Serve como ponto de partida para sintetizar a sequência não codificante. Essa é a diferença entre os primers forward e reverse.

Referência:

1. "Primer (biologia molecular)." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 20 de fevereiro de 2018. Disponível aqui 
2. "Reação em cadeia da polimerase (PCR)." Khan Academy. Disponivel aqui 

Cortesia da imagem:

1.'Primers RevComp Melted2'By Richard Wheeler (Zephyris) - Obra própria, (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia