A cultura de células animais é realizada para manter as linhas de células animais, a fim de realizar muitas atividades de pesquisa. As linhas de células animais são mantidas em condições estéreis e requerem técnicas especiais. Eles são usados em estudos sobre a produção de vacinas, para identificar o comportamento da célula a agentes cancerígenos e mutagênicos e em pesquisas sobre câncer. Os meios de cultura de células são muito importantes para o sucesso da cultura de células animais. Existem diferentes tipos de meios de cultura de células, como Meio Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) e Meio Essencial Mínimo da Eagle (EMEM). O DMEM é um meio basal modificado com concentrações aumentadas de aminoácidos e vitaminas em até quatro vezes. Isso também inclui mais algumas substituições que aumentam as condições nutricionais da mídia. O EMEM é um dos primeiros tipos de meios de cultura de células animais desenvolvidos por Harry Eagle. É um meio simples e basal com quantidades mínimas de composições de nutrientes. o diferença chave entre dois meios é a composição de nutrientes. O EMEM é composto pelas concentrações mínimas de nutrientes necessárias para o crescimento da cultura, enquanto o DMEM é um meio muito complexo, com maiores concentrações de aminoácidos e vitaminas.
1. Visão geral e principais diferenças
2. O que é DMEM
3. O que é o EMEM
4. Semelhanças entre DMEM e EMEM
5. Comparação lado a lado - DMEM vs EMEM em forma de tabela
6. Resumo
O meio de Eagle modificado da Dulbecco (DMEM) é um tipo de meio modificado que é preparado comercialmente como um pó branco-amarelado. Isso é adaptado do EMEM, e a composição de nutrientes é modificada aumentando a concentração de aminoácidos e vitaminas. A concentração de aminoácidos é aumentada em até duas vezes em comparação com o meio basal. A concentração de vitaminas é aumentada em até quatro vezes, aumentando assim o conteúdo de nutrientes no meio.
O DMEM também é modificado pela adição de mais sais, como nitrato férrico, piruvato de sódio e alguns aminoácidos não essenciais, como serina e glicina. A concentração de glicose no meio também é alterada. A formulação original é composta por 1000 mg / L de glicose, enquanto no DMEM, a concentração é aumentada até 4500 mg / L. O DMEM também requer a suplementação de um meio sérico, pois não é um meio completo. Na maioria das vezes, o DMEM é suplementado com soro fetal bovino (SBF). O FBS fornece as proteínas e fatores de crescimento necessários para o processo de cultura.
O pH do meio varia com a adição de bicarbonato de sódio. O pH do meio antes da adição de bicarbonato de sódio é de 6,80 a 7,40, enquanto o pH após a adição de bicarbonato de sódio fica na faixa de 7,60 a 8,20. A temperatura de armazenamento da mídia é 2 - 8 0 0C.
Figura 01: DMEM
O Meio Essencial Mínimo da Eagle (EMEM) é um dos primeiros meios desenvolvidos na cultura de células de linhagens de animais. Os primeiros tipos de linhas de células animais cultivadas usando EMEM incluem células L de mouse e células HeLa. A mídia EMEM também é um tipo de mídia modificada. Harry Eagle formulou primeiro o meio EMEM. O meio EMEM incluiu os aminoácidos e vitaminas essenciais em uma concentração mínima exigida pelos tipos de células. Os aminoácidos não essenciais não foram incluídos na formulação e as concentrações de glicose e bicarbonato de sódio são reduzidas. Embora a mídia contivesse a quantidade equilibrada de requisitos mínimos de crescimento para o crescimento bem-sucedido das células.
O EMEM não é um meio completo. Portanto, a suplementação com soro é necessária para o crescimento bem-sucedido das células de mamíferos. O EMEM é usado em uma ampla variedade de células e ainda é uma mídia popular entre os pesquisadores de cultura celular.
DMEM vs EMEM | |
DMEM é um tipo modificado de meio basal, com concentrações aumentadas de aminoácidos e vitaminas. Isso também inclui algumas substituições que aumentam as condições nutricionais dos meios. | O EMEM é um dos primeiros tipos de meios de cultura de células animais desenvolvidos por Harry Eagle. É um meio simples e basal com quantidades mínimas de composições de nutrientes. |
Modificações do aminoácido | |
A concentração de aminoácidos aumentou duas vezes no meio DMEM. | Concentração mínima de aminoácidos é usada no EMEM. |
Modificações de vitaminas | |
A concentração de vitaminas aumentou quatro vezes no DMEM. | Concentração mínima de vitaminas é usada no EMEM. |
Concentração de glicose | |
A concentração de glicose aumentou até 4500 mg / L no DMEM. | A concentração de glicose é de 1000 mg / L no EMEM. |
Presença de aminoácidos não essenciais | |
Presente no DMEM. | Ausente no EMEM. |
Presença de componentes adicionais | |
Componentes como nitrato férrico e piruvato de sódio estão presentes no DMEM. | EMEM contém a quantidade mínima de nutrientes. |
DMEM e EMEM são dois meios populares de cultura de células animais que diferem principalmente em suas composições de nutrientes. DMEM é uma forma modificada de EMEM, onde as concentrações de nutrientes são aumentadas juntamente com a adição de alguns novos componentes. O EMEM é um meio mínimo e contém todos os fatores essenciais necessários para o crescimento bem-sucedido das linhas de células animais. Esses meios devem ser usados sob condições altamente estéreis e os dois meios devem ser complementados com o soro antes do uso. Esta é a diferença entre DMEM e EMEM.
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1.Arora, Meenakshi. "Meios de cultura celular: uma revisão." Materials and Methods, 25 de novembro de 2017. Disponível aqui
2. “Meio essencial mínimo da Eagle.” Wikipedia, Wikimedia Foundation, 24 de dezembro de 2017. Disponível aqui
1.'Lifetech-DMEM'By Phaeton68 - Trabalho próprio, (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia