Diferença entre CFU e MPN

Diferença de chave - CFU vs MPN
 

A unidade formadora de colônias (UFC) e o número mais provável (MPN) são dois métodos usados ​​para enumerar microorganismos nas amostras. Ambos os parâmetros são usados ​​para detectar a qualidade da água e bactérias indicadoras fecais em amostras de água. Unidade formadora de colônias é uma medida usada para enumerar o número de células bacterianas viáveis ​​ou células de fungos em volume ou peso específico de uma determinada amostra. A unidade padrão para este parâmetro é UFC / ml ou UFC / g. O número mais provável é outra unidade usada para medir o número de células bacterianas viáveis ​​em uma amostra líquida. A principal diferença entre UFC e MPN é que A UFC é calculada a partir das colônias bacterianas e fúngicas que crescem em uma placa de ágar sólida enquanto O MPN é calculado a partir de bactérias viáveis ​​que crescem em meio líquido.

CONTEÚDO

1. Visão geral e principais diferenças
2. O que é CFU 
3. O que é MPN
4. Comparação lado a lado - CFU vs MPN em forma de tabela
5. Resumo

O que é CFU?

Unidade formadora de colônias (UFC) é um parâmetro que mede o número de células bacterianas ou fúngicas viáveis ​​em uma determinada amostra. O método que conta as unidades formadoras de colônias é referido como contagem de placas padrão. As colônias viáveis ​​que aparecem nas placas de ágar são expressas em UFC por 1 ml (unidade formadora de colônias por mililitro) da amostra para líquidos ou UFC por 1 g (unidade formadora de colônia por um grama) da amostra para sólidos.

Existem dois métodos comuns usados ​​para medir a UFC em uma amostra. Eles são método de espalhar a placa e derramar placa método. Esses dois métodos são suportados por uma técnica chamada diluição serial. As amostras diluídas em série permitem obter um número contável de colônias na superfície do ágar. Um volume conhecido de amostra pode ser espalhado sobre a superfície de uma placa de ágar ou misturado com ágar e vertido sobre uma placa. A placa é então incubada e as colônias resultantes são contadas. O número de colônias refere-se ao número de microrganismos na amostra original. As placas que mostram muitas colônias ou poucas colônias são excluídas da contagem porque os resultados podem não ser estatisticamente precisos nessas placas. Estatisticamente, o melhor intervalo é de 30 a 300 colônias em uma placa de ágar. Portanto, as placas corretas devem ser selecionadas para enumeração precisa. A diluição serial é realizada para a função acima.

Depois de contar o número de colônias viáveis ​​nas placas, UFC / ml pode ser calculado usando a seguinte equação.

UFC por ml de amostra original = número de colônias em uma placa X fator de diluição

Fator de diluição = (1 / Diluição da placa)

Por exemplo, se você obtiver 149 colônias na placa dos 10^-4 diluição, o número de bactérias em 1 ml da amostra original pode ser calculado da seguinte forma:

UFC / ml = (149) x (1/10^-4)

= 149 × 10⁴ ou 1490000

= 1. 49 x 10⁶

Figura 01: Unidade de formação de colônias

O que é MPN?

o número mais provável é uma medida alternativa à UFC / ml. O MPN também estima as células viáveis ​​em uma amostra líquida. Conta organismos que crescem em uma cultura líquida e é uma técnica predominantemente bacteriológica. Este método é particularmente útil para amostras que contêm baixas concentrações de células bacterianas; por exemplo, leite, água potável etc. O valor de MPN é expresso para 100 ml de volume. O MPN baseia-se em um método estatístico baseado na teoria da probabilidade. Existem tabelas estatísticas projetadas para encontrar valores de MPN por 100 ml da amostra. Essas tabelas mostram os resultados com limites de confiança de 95%.

O valor do MPN é calculado após a execução de uma técnica denominada método de fermentação por tubos múltiplos. Três conjuntos de tubos contendo um meio de cultura adequado são inoculados com três volumes diferentes da amostra, como 10 ml, 1 ml e 0,1 ml, e incubados para o crescimento. Após o período de incubação, os tubos são pontuados + (positivo) ou - (negativo) quanto à presença ou ausência de crescimento. O padrão de resultados positivos e negativos é então comparado com uma tabela MPN de probabilidades estatísticas para estimar o número de microrganismos. Em seguida, o valor de MPN é fornecido para 100 ml da amostra. O MPN é amplamente utilizado para detectar bactérias coliformes presentes em amostras de água.

Figura 02: tabela MPN

Qual é a diferença entre CFU e MPN?

CFU vs MPN
UFC é uma medida usada para expressar o número de colônias bacterianas ou fúngicas viáveis ​​em uma determinada amostra.	O MPN é uma medida alternativa à UFC e mede o número de células bacterianas viáveis ​​em uma amostra líquida.
Unidade
UFC / ml ou UFC / g	MPN / 100 ml
Cálculo
A UFC é calculada contando o número de colônias cultivadas em placas de ágar.	O MPN é calculado comparando padrões positivos e negativos dos tubos com a tabela estatística do MPN.
Técnica de diluição serial
A diluição serial é realizada antes de colocar as amostras em placas de ágar.	Normalmente, a diluição serial não é realizada quando o MPN é calculado
Métodos
Os métodos de espalhamento e despejo são dois tipos de métodos para obter a UFC.	A fermentação em tubos múltiplos é o método realizado para obter o valor de MPN.

Resumo - CFU vs MPN

Medir o crescimento microbiano é necessário por várias razões. Nas plantas de processamento de alimentos, é necessário medir o nível e o tipo de microorganismos presentes nos alimentos. Na indústria alimentícia e na medicina, é necessário garantir que os tratamentos de esterilização sejam efetivamente aplicados. Nas estações de tratamento de esgoto, é necessário realizar a contagem microbiana rotineiramente. Ao otimizar o procedimento em biologia molecular, é necessário medir o número de colônias nas placas. Portanto, existem diferentes métodos de enumeração e medição de crescimento disponíveis. CFU e MPN são dois desses métodos amplamente adotados em vários campos. A UFC é uma medida do número de colônias bacterianas e fúngicas viáveis ​​presentes em uma determinada amostra. É calculado usando o método padrão de contagem de placas ou o método viável de contagem de placas. O MPN é outra medida que expressa o número de células bacterianas presentes em um determinado volume da amostra líquida. É calculado usando o método de fermentação de múltiplos tubos e a tabela MPN. Esta é a diferença entre CFU e MPN.

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Referências:

"Unidade formadora de colônias". Wikipedia. Fundação Wikimedia, 28 de maio de 2017. Web. Disponivel aqui. 01 junho 2017.
"Microbiologia - 014 - Número mais provável." Microbiologia - 014 - Número Mais Provável | Programa de Graduação em Microbiologia. N.p., n.d. Rede. Disponivel aqui. 01 junho 2017.

Cortesia da imagem:

1. " Contagem manual de CFU ”Por Quentin Geissmann - Trabalho próprio (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. “OSC Microbio 00 EE MPNTable” Por CNX OpenStax - (CC BY 4.0) via Commons Wikimedia