Diferença entre eletroforese em gel 1D e 2D

o diferença chave entre eletroforese em gel 1D e 2D são as propriedades usadas para a separação de proteínas na eletroforese em gel. A eletroforese em gel 1D separa apenas proteínas com base no peso molecular, enquanto a eletroforese em gel 2D separa proteínas com base em seu ponto isoelétrico e peso molecular.

A separação de proteínas por eletroforese em gel é uma técnica importante para caracterizar proteínas. As proteínas têm propriedades variadas; portanto, a separação é mais complexa em comparação à separação do DNA por eletroforese em gel de agarose.

CONTEÚDO

1. Visão geral e principais diferenças
2. O que é eletroforese em gel 1D
3. O que é eletroforese em gel 2D
4. Semelhanças entre eletroforese em gel 1D e 2D
5. Comparação lado a lado - eletroforese em gel 1D vs 2D em forma de tabela
6. Resumo

O que é eletroforese em gel 1D?

A eletroforese em gel 1D, também conhecida como eletroforese em gel de uma dimensão, é um método de separação de proteínas com base no peso molecular. A separação de proteínas ocorre principalmente usando eletroforese em gel de poliacrilamida. Com base no conceito de eletroforese em gel, as moléculas se separam em suas propriedades de peso molecular e carga.

Portanto, para dar uma carga uniforme às proteínas, o tratamento com dodecilsulfato de sódio (SDS) é feito antes da eletroforese em gel. SDS desnatura proteínas e fornece uma carga negativa uniforme sobre a proteína; quando ocorre a aplicação do campo elétrico, as proteínas migram para o terminal positivo com base em seu peso molecular. Assim, na separação, apenas uma propriedade é considerada. É por isso que esse método é denominado eletroforese em gel 1D.

Figura 01: Eletroforese em gel 1D

Durante a eletroforese em gel 1D, as proteínas são separadas com base no seu peso molecular. A este respeito, as moléculas de menor peso migram mais rapidamente no gel em comparação com as proteínas de alto peso molecular. Assim, proteínas de alto peso permanecem próximas aos poços.

O que é eletroforese em gel 2D?

A eletroforese em gel 2D ou eletroforese em gel bidimensional separa as proteínas com base em duas propriedades. As duas propriedades são o ponto isoelétrico da proteína e o peso molecular. Este método de separação de proteínas aumenta a resolução da separação de proteínas. O ponto isoelétrico da proteína depende do pH no qual a proteína é neutra.

Figura 02: Eletroforese em gel 2D

Assim, na eletroforese em gel 2D, a proteína é deixada correr em um gradiente de pH fixo na primeira dimensão. Na segunda dimensão, as proteínas são separadas usando eletroforese em gel de poliacrilamida vertical ou horizontal. Assim, as proteínas se separam de acordo com seu peso molecular na segunda dimensão.

Além disso, esse método de eletroforese em gel aumenta a resolução da separação de proteínas. Portanto, as proteínas separadas são mais puras. No entanto, o custo da técnica é muito superior a eletroforese em gel de uma dimensão.

Quais são as semelhanças entre eletroforese em gel 1D e 2D?

• Ambas as técnicas separam proteínas.
• Por isso, são importantes na caracterização de proteínas.

Qual é a diferença entre eletroforese em gel 1D e 2D?

A principal diferença entre a eletroforese em gel 1D e 2D é que a eletroforese em gel 1D separa as proteínas com base apenas no peso molecular, enquanto a eletroforese em gel 2D separa as proteínas com base no ponto isoelétrico e no peso molecular. Devido a essa diferença básica entre a eletroforese em gel 1D e 2D, a resolução da separação das proteínas e o custo das duas técnicas também variam. A eletroforese em gel 2D mostra alta resolução do que a eletroforese em gel 1D. No entanto, a eletroforese em gel 2D é mais cara que a eletroforese em gel 1D.

O infográfico abaixo resume a diferença entre eletroforese em gel 1D e 2D.

Resumo - Eletroforese em Gel 1D vs 2D

A separação de proteínas depende de muitos fatores. A eletroforese em gel 1D separa as proteínas com base apenas no peso molecular. No entanto, a eletroforese em gel bidimensional ou 2D aumenta a resolução da separação de proteínas. Além disso, a eletroforese em gel 2D separa proteínas com base no ponto isoelétrico e no peso molecular. Portanto, esses dados são importantes para o processamento a jusante de proteínas e no campo da proteômica. Assim, este é o resumo da diferença entre eletroforese em gel 1D e 2D.

Referência:

1. Galeva, Nadezhda e MichailAltermann. "Comparação de eletroforese em gel unidimensional e bidimensional como ferramenta de separação para análise proteômica de microssomas de fígado de rato: citocromos P450 e outras proteínas de membrana". Proteomics, Biblioteca Nacional de Medicina dos EUA, junho de 2002, disponível aqui.

Cortesia da imagem:

1. “Eletroforese - Enchendo poços de gel 1D com mistura de proteínas” Por Jean-Etienne Poirrier - Enchendo poços de gel 1D com mistura de proteínas (CC BY-SA 2.0) via Commons Wikimedia
2. "Eletroforese 2D" pelo Instituto Nacional de Saúde - Programa de Nanobiologia do Centro de Pesquisa do Câncer, Instituto Nacional de Saúde (Domínio Público) via Commons Wikimedia